[發明專利]谷子高葉酸的分子標記及應用

在審

• 申請號: 202011233178.2
• 申請日: 2020-11-06
• 公開（公告）號: CN112301045A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 張美萍;陜永杰;賀佳星;韓李權;劉永忠
• 申請（專利權）人: 山西師范大學;山西農業大學
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種谷子高葉酸的分子標記及應用。所述分子標記序列如SEQ ID NO.1所示。本發明基于RNA轉錄組測序，分析谷子中與葉酸合成相關的差異基因表達，結合生物信息學分析方法，開發高葉酸谷子分子標記，為后期谷子育種奠定基礎。本發明提供的高葉酸含量谷子品種鑒定方法在鑒定和選育高葉酸含量谷子品種中具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種谷子高葉酸的分子標記及應用。

背景技術

谷子是我國重要的糧食作物之一，種植面廣，受眾面廣。隨著環境和人們生活需求的改變，優良谷子品種的選育工作仍然勢在必行。谷子品種的選育主要包括傳統雜交育種和現代分子標記選育技術，傳統雜交育種依靠天然基因的不同組合，首先需要選擇目的性狀優良的父本和母本，該方法對雜交方法和設備要求不高，但是耗時長。現代分子標記選育技術是近年來逐漸興起的育種技術，利用了分子標記能夠反映生物個體或種群間基因組中某種差異的特性，能夠針對谷子不同性狀進行選育，目的性更強，效果更佳明顯，且耗時短，所以是目前谷子品種選育的熱門技術。

現有技術關于谷子分子標記的研究包括：與谷子葉鞘色性狀連鎖的分子標記，與谷子高類胡蘿卜素相關的分子標記，與谷子穎殼顏色形狀相關的分子標記，與谷子米色形狀相關的分子標記，與谷子抗咪唑乙煙酸除草劑基因緊密連鎖的分子標記等多個方面。這對于谷子性狀的改善具有重要意義，可指導分子育種。

葉酸是一種水溶性維生素，是維持生命活動的重要維生素，其能夠參與遺傳物質和蛋白質的代謝，促進動物繁殖和生長和提高免疫力。目前妊娠婦女或者計劃妊娠婦女均提倡服用葉酸，用以預防胎兒發育缺陷。因此培育高葉酸含量的谷子品種，對于提高人膳食中葉酸的攝入量具有重要健康價值。然而，現有技術并未出現關于谷子葉酸分子標記的研究。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種谷子高葉酸的分子標記及應用。

本發明的目的是提供一種谷子高葉酸的分子標記，所述分子標記序列如SEQ IDNO.1所示。

本發明還提供了一種所述所述分子標記在鑒定和選育高葉酸含量谷子品種的應用。

優選的，上述應用中，用于擴增所述分子標記的qRT-PCR引物如下：

F-5’-GACCACATCGCCTTCCAT-3’

R-5’-CCTGATGGACGCTAGTGTTCT-3’。

優選的，上述應用中，高葉酸含量谷子品種鑒定方法如下：

步驟1，提取谷子樣品的總RNA，并反轉錄為cDNA；

步驟2，以上述cDNA為模板，以谷子18s rRNA為內參基因，進行qRT-PCR；

內參基因引物如下：

F-5’-AAAGTTGGGGGCTCGAAGA C-3’；

R-5’-GGTCGGCATCGTTTATGGTTG-3’；

模板引物如下：

F-5’-GACCACATCGCCTTCCAT-3’

R-5’-CCTGATGGACGCTAGTGTTCT-3’

測定SEQ ID NO.1所示基因表達量，表達量高的為高葉酸谷子品種。

優選的，上述應用中，所述qRT-PCR體系如下：

Tip Green qPCR SuperMix 7.5μl，F引物各0.3μl，R引物各0.3μl，Passive Refence DyeI 0.3μl，cDNA 2μl，Nucleas-free water補足15μl；