[發明專利]一種桑葉中超微量吡丙醚的檢測方法

在審

• 申請號: 202011226209.1
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112697891A
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 肖艷;蔣滿貴;歐陽小艷;黃深惠;覃慶;李碩;鄒克堅;唐亮;潘志新;黃旭華;王霞
• 申請（專利權）人: 廣電計量檢測(南寧)有限公司;廣西壯族自治區蠶業技術推廣站
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳偉斌

本發明提供一種桑葉中超微量吡丙醚的檢測方法。本發明的檢測方法包括樣品的提取、凈化和檢測，選用乙腈和無機鹽類吸附劑提取桑葉中的吡丙醚；選用甲酸?甲酸胺溶液和乙腈作為流動相，并對洗脫條件進行優化，可以使吡丙醚有較高的離子化程度和較長的保留時間，提高桑葉中吡丙醚檢測的準確度和靈敏度。通過優化提取方式以及色譜等條件，提高了桑葉中吡丙醚檢測的準確度和靈敏度，且重現性好，檢測限可達到0.00002mg/kg。

技術領域

本發明屬于檢測技術領域，具體涉及一種桑葉中超微量吡丙醚的檢測方法。

背景技術

桑葉作為蠶的主要食物來源，其安全性直接關系到蠶的健康，進而影響蠶絲的產量。近年來，隨著農藥種類和使用量的不斷增多，生產中因誤喂被農藥污染的桑葉或者農藥殘留效期未過的桑葉而造成桑蠶農藥中毒的事故屢見不鮮，農藥污染對養蠶危害的問題日趨凸顯，給養蠶戶造成很大的經濟損失。

吡丙醚是一種保幼激素類殺蟲劑，具有胃毒、觸殺和內吸作用，不僅具有強殺卵活性，還可影響幼蟲蛻皮和繁殖，蠶誤食了因吡丙醚農藥污染的桑葉，會使蠶的生物功能發生紊亂，影響其吐絲能力，造成蠶絲減產。

目前，對于食品中吡丙醚殘留量的檢測方法主要有氣相色譜-氮磷檢測法(GC-NPD)、氣相色譜-串聯質譜法(GC-MS/MS)、高效液相色譜-串聯質譜法(HPLC-MS/MS)和毛細管電泳法，其中高效液相色譜-四極桿串聯質譜法以其靈敏度高、準確性高等優點成為分析食品中吡丙醚殘留量的首選方法。近年來，已有相關文獻報導了桑葉中農藥殘留量的檢測方法。如，趙廣宇(趙廣宇等.液相色譜-串聯質譜法測定蔬菜水果中的吡丙醚殘留量[J].色譜,2009,27(004):421-424.)等人報導了采用液相色譜-串聯質譜法測定蔬菜水果中的吡丙醚含量，水果中吡丙醚的檢測限為5μg/kg；黃莉莉(黃莉莉等.LC-MS/MS法測定桑葉藥材中100種農藥殘留量[J].中國藥房,2016(15期):2122-2126.)等人報導了采用液相色譜-串聯質譜法測定桑葉藥材中農藥殘留量的方法，但是并未檢測桑葉中吡丙醚的含量。

現有的檢測方法中，食品中吡丙醚的檢測限較高，且并未有公開針對桑葉中吡丙醚的含量進行檢測的方法，無法滿足桑葉中低含量吡丙醚的檢測，因此，需要開發一種針對桑葉的超微量吡丙醚的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于，克服現有技術中吡丙醚檢測限較高的缺陷，提供一種桑葉中超微量吡丙醚的檢測方法。本發明的檢測方法，通過優化提取方式以及色譜等條件，提高了桑葉中吡丙醚檢測的準確度和靈敏度，且重現性好，檢測限可達到0.00002mg/kg。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種桑葉中超微量吡丙醚的檢測方法，包括如下步驟：

S1.標準樣品溶液的配制；

S2.待測液的制備：

將桑葉樣品粉碎并混合均勻后，加入乙腈、無機鹽類吸附劑混合均勻后離心，離心后取上清液得到萃取液，萃取凈化后，再離心，過濾，即得到待測液；

S3.檢測：

將S1所述標準樣品溶液和S2所述待測液采用超高液相色譜-串聯質譜進行檢測；

其中，所述超高液相色譜的流動相為：流動相A，甲酸-甲酸胺溶液；流動相B，乙腈。

本發明選用乙腈對桑葉中的吡丙醚樣品進行提取，可以降低桑葉中脂肪、蛋白質、鹽、糖類的溶解性，減輕凈化負擔；同時，加入無機鹽類吸附劑可以進一步抑制桑葉中鹽類物質的析出，同時吸附萃取出來的水溶性物質；本發明人創造性的發現，選用甲酸-甲酸胺溶液和乙腈作為流動相，可以提高吡丙醚的離子化程度和在色譜中的保留時間，便于提高桑葉中吡丙醚檢測的準確度和靈敏度。本發明的檢測方法，通過優化提取方式以及色譜等條件，提高了桑葉中吡丙醚檢測的準確度和靈敏度，且重現性好，檢測限可達到0.00002mg/kg。