[發明專利]一種原人參二醇人體內代謝產物檢測方法及系統

在審

• 申請號: 202011222941.1
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112485346A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 王延桂
• 申請（專利權）人: 王延桂
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 王光建

本發明屬于代謝產物檢測技術領域，公開了一種原人參二醇人體內代謝產物檢測方法及系統；通過取樣設備抽取并分離提取含原人參二醇的待測血漿樣品；通過濃度檢測設備利用外標法檢測待測血漿樣品中原人參二醇濃度數據；利用超高效液相色譜儀串聯AB 5600+Q TOF高分辨質譜儀，采用的流動相為水、乙腈，在0?40min內梯度洗脫；利用對照樣品與待測樣品產物進行對比檢測原人參二醇人體內代謝產物及識別未知代謝產物；通過硅膠柱層析的方式提取原人參二醇人體內代謝產物；利用分析程序對原人參二醇人體內代謝產物進行分析；本發明通過提供的乙腈制備方法可以制備更高純度的乙腈，從而大大提高原人參二醇人體內代謝產物檢測的準確性。

技術領域

本發明屬于代謝產物檢測技術領域，尤其涉及一種原人參二醇人體內代謝產物檢測方法及系統方法。

背景技術

目前，原人參二醇(aPPD)是人參皂苷經過胃腸道菌群的去糖代謝活化后產生的具有藥物療效的活性成分，具有廣譜的抗腫瘤作用。人參皂苷(Ginsenoside)是一種固醇類化合物，三萜皂苷。主要存在于人參屬藥材中。人參皂苷都具有相似的基本結構，都含有由30個碳原子排列成四個環的甾烷類固醇核。他們依糖苷基架構的不同而被分為兩組：達瑪烷型和齊墩果烷型。達瑪烷類型包括兩類：人參二醇型-A型，苷元為20(S)-原人參二醇。包含了最多的人參皂苷，如人參皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3、Rh2及糖苷基PD；人參三醇型-B型，苷元為20(S)-原人參三醇。包含了人參皂苷Re、Rg1、Rg2、Rh1及糖苷基PT。然而，現有原人參二醇人體內代謝產物檢測方法及系統檢測過程中采用的乙腈原料純度低導致檢測不準確；同時，提取的原人參二醇人體內代謝產物復雜繁瑣。

通過上述分析，現有技術存在的問題及缺陷為：(1)現有原人參二醇人體內代謝產物檢測方法及系統檢測過程中采用的乙腈原料純度低導致檢測不準確；

(2)提取的原人參二醇人體內代謝產物復雜繁瑣。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種原人參二醇人體內代謝產物檢測方法及系統。

本發明是這樣實現的，一種原人參二醇人體內代謝產物檢測系統的檢測方法，包括：

步驟一，通過取樣設備抽取并分離提取含原人參二醇的待測血漿樣品；通過濃度檢測設備利用外標法檢測待測血漿樣品中原人參二醇濃度數據；

采用Zorbax Extent C₁₈柱，流動相為甲醇和水，比例為85:15，流速為1.2ml/min，檢測波長203nm，柱溫30℃，進樣量12μL，對照品溶液濃度為0.5mg/ml，以外標法測定原人參二醇的含量及濃度；

步驟二，利用超高效液相色譜儀串聯AB 5600+Q TOF高分辨質譜儀，采用的流動相為水、乙腈，在0-40min內梯度洗脫；通過超高效液相色譜儀串聯AB5600+Q TOF高分辨質譜儀，采用的流動相為水、乙腈，在0-40min內梯度洗脫；在梯度洗脫過程中，所述流動相中水所占體積百分比從66％降至9％再升至66％，所述流動相中乙腈所占體積百分比從32％升至89％再降至32％；

步驟三，廢舊有機塑料在催化劑和載氣存在下加熱進行反應，然后經過冷卻分離得到含有乙腈的液體產物；

步驟四，氣相反應工序，使乙酸與氨在固體酸催化劑的存在下進行氣相反應，加入含有乙腈的液體產物進行混合得到含水粗乙腈；WHSV為0.5～20h-1，WHSV表示每1小時原料供給量/催化劑填充量；

步驟五，純化工序，對所述含水粗乙腈進行純化，得到產品乙腈，所述產品乙腈中的甲苯含量相對于乙腈100質量％為小于1.0質量ppm；所述含水粗乙腈中，水的含量相對于所述含水粗乙腈100質量％為47質量％以上、并且甲苯的含量相對于乙腈100質量％為1質量ppm以上，所述固體酸催化劑為介孔沸石；純化中，具體包括：

濃縮工序，將氨從所述含水粗乙腈中分離，得到粗乙腈；