[發明專利]一種司美格魯肽的合成方法

有效

• 申請號: 202011221694.3
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112321699B
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發明（設計）人: 馬亞平;戴政清;張凌云;王宇恩;付信;周迎春;王慶磊
• 申請（專利權）人: 深圳深創生物藥業有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/10;C07K1/04;C07K1/06
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 范盈

本發明涉及多肽合成領域，特別涉及一種司美格魯肽的合成方法。本發明通過在常規的固相載體上，引入一個離子液體的Linker，然后通過固相合成法依次連接司美格魯肽序列中相對應的氨基酸，裂解、純化，得到司美格魯肽精肽。本發明提供的方法，具有工藝簡單，成本低、收率高的優點，相比于常規的化學合成方法來說，采用本發明的方法，通過增加離子液體Linker，通過陰離子的交換，完成改變了固相載體的特性，增加了樹脂在溶劑中的溶脹性能，從而改善了固相合成的氨基酸殘基的偶聯效率，解決PS樹脂本身的疏水性特性，避免肽鏈延長過程中的肽鏈聚集，從而解決司美格魯肽本身序列由于β?折疊造成的殘基固相偶聯困難、收率較低的問題。

技術領域

本發明涉及多肽合成領域，特別是GLP-1類似物司美格魯肽的合成方法。

技術背景

司美格魯肽是由諾和諾德公司研發的長效GLP-1類似物，只需要進行每周一次的皮下注射給藥或者每天一次的口服給藥。

從結構上看，司美格魯肽需要在20位Lys接上兩個AEEA、γ-谷氨酸和十八烷二酸脂肪鏈，其中2位采用非天然氨基酸氨基異丁酸。司美格魯肽的序列結構如下：

H-His¹-Aib²-Glu³-Gly⁴-Thr⁵-Phe⁶-Thr⁷-Ser⁸-Asp⁹-Val¹⁰-Ser¹¹-Ser¹²-Tyr¹³-Leu¹⁴-Glu¹⁵-Gly¹⁶-Gln¹⁷-Ala¹⁸-Ala¹⁹-Lys²⁰(AEEA-AEEA-γ-Glu-Octadecanedioic)-Glu²¹-Phe²²-Ile²³-Ala²⁴-Trp²⁵-Leu²⁶-Val²⁷-Arg²⁸-Gly²⁹-Arg³⁰-Gly³¹-OH

司美格魯肽現有的合成工藝，包括原研選擇的生物發酵結合化學合成的方法完成產品的制備方法(CN101910193)。采用此方法合成，生物發酵方法制備GLP-1(11-37)片段之后，N-末端氨基和Ser、Thr和Tyr側鏈的羥基均沒有進行保護，直接和側鏈的OSu酯進行反應，容易導致多位點的反應，形成大量非預期的雜質，不利于后期的分離純化，收率也比較低。

司美格魯肽現有的合成工藝，還包括一些傳統的多肽固相合成以及片段縮合的合成方法(CN 103848910、CN 106928343、CN106478806、WO2016046753等)。在所有的這些各種方法，采用線性偶聯的方法，基本上很難有好的合成效果，主要是司美格魯肽本身的多肽序列結構，N-末端片段：H-His¹-Aib²-Glu³-Gly⁴-Thr⁵-Phe⁶-Thr⁷-Ser⁸-Asp⁹-Val¹⁰-Ser¹¹-Ser¹²-Tyr¹³-Leu¹⁴-，因為較強的疏水性，容易形成β-折疊等二級結構，偶聯非常困難，縮合效率很低。而一些片段縮合的方法，也是為了解決線性偶聯困難的問題。但是，目前一些片段縮合的方法，當合成規模放大到生產之后，片段的溶解問題，片段的偶聯效率問題，還有片段溶解的放熱問題等，都會影響最后的合成效果。另外，片段縮合在操作上也比較復雜，不利于工業化生產。