[發明專利]一種β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011220020.1
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN112301093A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 王永凱;馬蒙蒙;唐贊;王瑞;劉立明;盧孟孟;孫杰;胖鐵良;李建中
• 申請（專利權）人: 諾道中科（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/34
• 分類號: C12Q1/34
• 代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901
• 代理人: 張海青

1.一種β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，包括反應液、沉淀劑、終止液、線性標準品、對照品，其中，所述線性標準品為4-甲基傘形酮溶液，所述反應液為4-甲基傘形酮酰-β-D-葡糖腦苷脂溶液。

2.根據權利要求1所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述4-甲基傘形酮酰-β-D-葡糖腦苷脂溶液為酸性溶液，由緩沖液調節pH。

3.根據權利要求2所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述4-甲基傘形酮酰-β-D-葡糖腦苷脂溶液的pH為4.0～6.0；

所述緩沖液為選自醋酸-醋酸鈉緩沖液、PBS緩沖液、Goods緩沖液、tris緩沖液、檸檬酸鈉-磷酸氫二鉀緩沖液、mops緩沖液、磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液、pipes緩沖液和hepes緩沖液中的至少一種。

4.根據權利要求1所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述反應液的制備方法為：4-甲基傘形酮酰-β-D-葡糖腦苷脂10mmol加入到純化水中攪拌充分溶解，加入緩沖液調節溶液的pH為4.0～6.0，定容至1000mL。

5.根據權利要求1所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述線性標準品的濃度包括40nmol/L、100nmol/L、200nmol/L、400nmol/L和500nmol/L。

6.根據權利要求1所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述沉淀劑為氫氧化鋇、碳酸鈉、硫酸鋅、氫氧化鈉、碳酸氫鈉中的一種或幾種的混合溶液，所述沉淀劑的離子濃度為0.5mol/L。

7.根據權利要求1所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述終止液中為碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鋇中的一種或幾種的混合溶液，所述終止液的離子濃度為0.5mol/L～1.0mol/L。

8.根據權利要求1所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述對照品為健康人群的全血樣本制備的干血片或純酶樣本。

9.根據權利要求8所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述干血片對照品分為陰性對照品、弱陽性對照品和陽性對照品，是通過血細胞和正常人全血樣本制備的干血片樣本，其中血細胞比容為50～55％。

10.根據權利要求8所述的β-葡糖腦苷脂酶活性的檢測試劑盒，其特征在于，所述純酶對照品為β-葡糖腦苷脂酶溶液，各水平參考品制備方法如下：

β-葡萄糖苷酶初始濃度為2.5U/ml,用0.2ug/ul的BSA溶液分4次稀釋到1×10^-7U/ml濃度，記為質控品1；用0.2ug/ul的BSA溶液稀釋質控品1到5×10^-8U/ml濃度，記為質控品2；按照下表用0.2ug/ul的BSA溶液稀釋質控品2，分別得到質控品3～8。