[發(fā)明專利]雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法與用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011219502.5
• 申請(qǐng)日: 2020-11-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112402382B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳敏生;蔡延濱;溫展鵬;區(qū)彩文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院
• 主分類號(hào): A61K9/19
• 分類號(hào): A61K9/19;A61K31/4184;A61K47/42;A61P9/10;B82Y5/00;B82Y40/00;C07K7/08;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京匯捷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531
• 代理人: 李宏偉

1.雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

替米沙坦溶于二甲基亞砜得到替米沙坦溶液并加熱備用；

制備第一多肽；

所述第一多肽加入磷酸鹽緩沖液，用碳酸鹽溶液調(diào)節(jié)其酸堿值，并超聲溶解，得到第一多肽溶液；

將所述第一多肽溶液加熱至沸騰后冷卻，加入所述替米沙坦溶液，混勻后置于水中反應(yīng)，得到共組裝納米水凝膠；

最后通過(guò)高速離心去除所述共組裝納米水凝膠中未反應(yīng)的替米沙坦，凍干后以制得雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物；

所述第一多肽的序列為NBD-F^DF^DY^D-E^DE^D-G-DRVYIHP。

2.如權(quán)利要求1所述的雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法，其特征在于，所述制備第一多肽包括以下步驟：

制備NBD封端基團(tuán)；

用二氯甲烷將二氯樹(shù)脂溶脹；

以所述二氯樹(shù)脂作為固相載體，并按照預(yù)設(shè)順序依次加Fmoc系列保護(hù)氨基酸和所述NBD封端基團(tuán)，并經(jīng)N，N-二甲基甲酰胺處理后得到含肽鏈的樹(shù)脂；

用二氯甲烷洗凈樹(shù)脂中的N，N-二甲基甲酰胺，加入三氟乙酸將肽鏈從樹(shù)脂上切下來(lái)；

真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去三氟乙酸，得到粘稠的液體后加入無(wú)水乙醚析出的沉淀即為產(chǎn)物；

產(chǎn)物經(jīng)液相色譜提純后即可得到第一多肽。

3.如權(quán)利要求2所述的雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法，其特征在于，所述制備NBD封端基團(tuán)包括如下步驟：

將β-丙氨酸和碳酸鉀按第一質(zhì)量比溶入甲醇和水的混合液中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行攪拌，得到第一混合溶液；

將NBD-Cl溶入甲醇中，得到第二混合溶液；

將所述第二混合液注入到所述第一混合溶液中，在室溫下進(jìn)行反應(yīng)，直到反應(yīng)完成，得到第一反應(yīng)液；

除去所述第一反應(yīng)液中的甲醇，并用鹽酸將剩余水溶液的酸堿值調(diào)節(jié)至預(yù)設(shè)范圍得到第三混合溶液；

過(guò)濾所述第三混合溶液，得到濾液和棕黃色固體沉淀，收集棕黃色固體沉淀，得到第一產(chǎn)物；

將所述濾液用無(wú)水乙醚或二氯甲烷萃取，收集有機(jī)相層，所述有機(jī)相層用無(wú)水硫酸鎂干燥后除去有機(jī)溶劑，得到第二產(chǎn)物；

所述第一產(chǎn)物和所述第二產(chǎn)物均為NBD封端基團(tuán)。

4.如權(quán)利要求2所述的雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法，其特征在于，所述預(yù)設(shè)順序?yàn)镕moc脯氨酸、Fmoc組氨酸、Fmoc異亮氨酸、Fmoc酪氨酸、Fmoc纈氨酸、Fmoc精氨酸、Fmoc天冬氨酸、Fmoc甘氨酸、D構(gòu)型的Fmoc谷氨酸、D構(gòu)型的Fmoc谷氨酸、D構(gòu)型的Fmoc酪氨酸、D構(gòu)型的Fmoc苯丙氨酸、D構(gòu)型的Fmoc苯丙氨酸、NBD封端基團(tuán)。

5.如權(quán)利要求4所述的雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法，其特征在于，以所述二氯樹(shù)脂作為固相載體，并按照預(yù)設(shè)順序依次加Fmoc系列保護(hù)氨基酸和所述NBD封端基團(tuán)，并經(jīng)N，N-二甲基甲酰胺處理后得到含肽鏈的樹(shù)脂是指：

稱取Fmoc脯氨酸與N，N-二異丙基乙胺，溶解在二氯甲烷中；

用甲醇和N，N-二異丙基乙胺封閉二氯樹(shù)脂；

用二氯甲烷清洗后，再換用N，N-二甲基甲酰胺清洗，加入哌啶反應(yīng)脫除Fmoc脯氨酸上的氨基保護(hù)基；

用N，N-二甲基甲酰胺清洗殘余的哌啶，再加入下一個(gè)Fmoc氨基酸，同時(shí)加入偶聯(lián)劑和N，N-二異丙基乙胺，直到反應(yīng)完成；

用二氯甲烷清洗，再換用N，N-二甲基甲酰胺清洗，加入哌啶反應(yīng)脫除Fmoc氨基酸上的氨基保護(hù)基；

按照預(yù)設(shè)順序重復(fù)操作，直到所有Fmoc氨基酸和NBD封端基團(tuán)都被加入后，加入哌啶反應(yīng)脫除NBD封端基團(tuán)上的氨基保護(hù)基，用N，N-二甲基甲酰胺清洗，即得到含有肽鏈的樹(shù)脂。

6.如權(quán)利要求3所述的雙配體靶向協(xié)同調(diào)控腎素血管緊張素系統(tǒng)的共組裝納米藥物的制備方法，其特征在于，所述酸堿值的預(yù)設(shè)范圍為1～2。