[發(fā)明專利]一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011214298.8
• 申請日: 2020-11-04
• 公開（公告）號: CN112433050A
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發(fā)明（設計）人: 劉海健;李堅;程光亮;李青梅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海賽罕生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/58
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒及其檢測方法，包括磁微粒混懸浮液，酶標工作液、樣品稀釋液和校準液；所述的磁微粒混懸浮液中含有鼠抗人IgM(μ)鏈單克隆抗體；所述酶標工作液中含有HRP標記的肺炎衣原體基因工程抗原；所述校準液采用肺炎衣原體IgM高效價抗體陽性血清稀釋制成；所述校準液含有中含有CP?IgM抗體。本發(fā)明能夠?qū)θ梭w內(nèi)的肺炎衣原體IgM抗體進行快速檢測并具有檢測效果好檢測準確度高的特點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)療檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒及其檢測方法。

背景技術(shù)

肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae，Cpn)作為衣原體屬的一種重要的呼吸道病原微生物，自從上個世紀80年代中期由Grayston 等人正式命名，在隨后的時間里被研究者們廣泛研究。現(xiàn)僅知人是該病原體的宿主，感染方式可能為人與人之間通過呼吸道分泌物傳播。5歲以下兒童極少受染，8歲以上兒童及青年易被感染，尤其是人群聚集處，如家庭、學校、兵營中易流行，經(jīng)血清流行病學調(diào)查，證實成人中至少有40％已受到該衣原體感染，大部分為亞臨床型。肺炎衣原體是專性細胞內(nèi)寄生的微生物，寄居于人呼吸道和咽喉等處，在兒童和成人中產(chǎn)生上呼吸道和呼吸道感染，常引起肺炎和支氣管炎等呼吸道疾病。目前研究表明，其還與動脈粥樣硬化綜合癥、老年癡呆癥、心肌炎、哮喘等疾病有關(guān)。臨床上由于其與其他呼吸道病原體引起的感染癥狀類似，因此常難以根據(jù)臨床表現(xiàn)、x-射線檢查等得出結(jié)論，確診往往依賴于實驗室診斷。快速有效的診斷方法應該是在疾病的發(fā)病初期就可以得到明確的診斷，便于實施針對性的治療，阻止病情的發(fā)展遷延。在人肺炎衣原體感染的實驗室診斷上，被檢者血清中抗人肺炎衣原體抗體指標則是診斷結(jié)果的重要依據(jù)之一。因此我們提供一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明提供一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒及其檢測方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

本發(fā)明一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒，包括磁微粒混懸浮液，酶標工作液、樣品稀釋液和校準液；

所述的磁微粒混懸浮液中含有鼠抗人IgM(μ)鏈單克隆抗體；所述酶標工作液中含有HRP標記的肺炎衣原體基因工程抗原；所述校準液采用肺炎衣原體IgM高效價抗體陽性血清稀釋制成；所述校準液含有中含有CP-IgM抗體。

一種肺炎衣原體IgM抗體檢測試劑盒的檢測方法，包括以下幾個步驟，

步驟1：向反應容器內(nèi)的樣本孔內(nèi)加入樣品稀釋液100μL/孔，每孔分別加入校準品或樣本10μL，每孔分別加入磁微粒混懸液20μL；

步驟2：混勻后37±0.5℃溫育15分鐘，并磁分離去上清；

步驟3：加300μL清洗液至檢測管中并混勻，并磁分離去上清；

步驟4：重復步驟3三遍，然后在反應容器內(nèi)樣本孔的每孔分別加入酶結(jié)合物100μL，混勻后37±0.5℃溫育15分鐘，并磁分離去上清；

步驟5：重復步驟4三遍，每孔加入發(fā)光底物A液和發(fā)光底物B 液各50μL，混勻后1～5分鐘檢測發(fā)光強度。

步驟6：利用分析儀將根據(jù)檢測信號和標準曲線自動計算出各樣本中被測物濃度，根據(jù)測物濃度判斷感染狀況。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述計算出各樣本中被測物濃度的方法是，以校準品發(fā)光強度RLU值的log值為y軸建立定標曲線，得到曲線方程Y＝m(X)+c及其線性相關(guān)系數(shù)R，將所讀樣品 RLU值的對數(shù)(Y)代入上述曲線方程，求得對應的X值，再求反對數(shù)后，即為所測樣品中CP-IgM抗體的濃度。