[發明專利]黃酮3β-羥化酶還原酶突變體及其應用有效
| 申請號： | 202011213591.2 | 申請日： | 2020-11-04 |
| 公開（公告）號： | CN112391360B | 公開（公告）日： | 2022-09-06 |
| 發明（設計）人： | 曾偉主;周景文;高松;陳堅;堵國成 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/00 | 分類號： | C12N9/00;C12N15/52;C12N15/81;C12N1/19;C12P17/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 黃酮 羥化酶 還原酶 突變體 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.黃酮3β-羥化酶還原酶突變體，其特征在于，以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酶為親本，所述突變體是將親本第626位氨基酸突變為天冬酰胺并將第641位的氨基酸突變為天冬氨酸；或是將親本的第453位的氨基酸突變為纈氨酸。
2.編碼權利要求1所述突變體的基因。
3.攜帶權利要求2所述基因的表達載體。
4.表達權利要求1所述突變體或含有權利要求2所述基因的微生物細胞。
5.一種微生物細胞，其特征在于，在權利要求4所述微生物細胞中表達黃酮3β-羥化酶。
6.一種全細胞轉化生產圣草酚的方法，其特征在于，以柚皮素為底物，在反應體系中加入權利要求5所述微生物細胞。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，將所述微生物細胞在25-32℃，200-250rpm培養16-18h，獲得種子液，將種子液以1-5mL/100mL的量加入反應體系中。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，每隔10-12小時向反應體系中補加柚皮素，反應70-80小時。
9.權利要求1所述突變體、或權利要求2所述基因、或權利要求3所述表達載體、或權利要求4或5所述微生物細胞在生產圣草酚中的應用。
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