[發明專利]一種異種脫細胞肌腱組織材料及其制備方法

有效

• 申請號: 202011212737.1
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112354015B
• 公開（公告）日: 2023-02-21
• 發明（設計）人: 趙金忠;李亞民;蔣佳;董士奎
• 申請（專利權）人: 上海市第六人民醫院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36
• 代理公司: 北京惠科金知識產權代理有限公司 11981
• 代理人: 鄭萌萌

1.一種異種脫細胞肌腱組織材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一，脫細胞前處理：采用循環漸進壓力模塊+分段超聲模塊，對肌腱組織結構進行疏松化；

步驟二，脫細胞：

S1，對前處理后的肌腱用去離子水進行水洗兩次；

S2，吸除水洗液，加入10-50mL消化液，50-500rpm揺床中消化0.5-4h；

S3，終止消化，然后水洗24-72小時，吸除水洗液，加入除垢劑，于50-500rpm揺床中處理1-4h；

S4，吸除所述除垢劑，加入去離子水水洗24-72h，重復三個水洗循環；

步驟三，脫細胞后處理：吸除水洗液，加入中和液，置于50-500rpm揺床中中和處理2-48h；吸除中和液，加入足量去離子水于揺床中水洗4-48h，重復兩個水洗循環；

脫細胞前處理后，所述肌腱組織變成扁平狀，其厚度為原來的1/5-1/2，且經超聲處理使內部致密膠原組織疏松化；

所述消化液為含胰酶的EDTA標準溶液，其中，所述胰酶的濃度為0.02-0.2％；所述消化液與待消化肌腱的體積比為5-10:1；

所述除垢劑包括如下濃度的組分：0-10％次氯酸溶液和1-10％曲拉通X-100；所述除垢劑與待消化肌腱體積比為3-10:1；

所述肌腱組織為豬肌腱組織。

2.根據權利要求1所述的異種脫細胞肌腱組織材料的制備方法，其特征在于，所述步驟二S1中所述水洗的條件為在50-500rpm揺床中，水洗12-72h。

3.根據權利要求1所述的異種脫細胞肌腱組織材料的制備方法，其特征在于，步驟二S3中所述終止消化的具體步驟為：吸除消化液，加入體積是消化液體積3-5倍的終止液，50-500rpm揺床中終止消化12-72h。

4.根據權利要求3所述的異種脫細胞肌腱組織材料的制備方法，所述終止液由在DMEM培養基中加入5-20％FBS、0-2％青霉素、0-2％鏈霉素和0-2％兩性霉素B配制而成。

5.根據權利要求1所述的異種脫細胞肌腱組織材料的制備方法，其特征在于，所述中和液為碳酸氫鈉溶液、碳酸氫鈣溶液、碳酸鈣溶液中的一種或兩種，濃度為1-10％；所述中和液與除垢劑的體積比為3-5:1。

6.根據權利要求1所述的異種脫細胞肌腱組織材料的制備方法，其特征在于，所述異種脫細胞肌腱組織材料需要進行冷凍干燥并冷凍保存。

7.一種如權利要求1-6任一項所述的制備方法制備的異種脫細胞肌腱組織材料。