[發明專利]一種定量蒿屬植物花粉中nsLTP過敏原的方法

有效

• 申請號: 202011210352.1
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112710837B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 高中山;趙嵐;高畢遠;付婉藝
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 沈金龍

1.一種定量蒿屬植物花粉中nsLTP過敏原的方法，其特征在于，使用雙單抗夾心酶聯免疫吸附實驗進行定量，其中一抗為A2-B8單抗，來自杭州艾樂吉生物科技有限公司，貨號MA-A2B8；二抗為A9-G10單抗，來自杭州艾樂吉生物科技有限公司，貨號MA-A9G10，

蒿屬植物為黃花蒿、艾蒿、茵陳蒿、細裂葉蓮蒿、大籽蒿、野艾蒿或北艾。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，二抗用生物素標記。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，使用HRP標記的羊抗鼠IgG結合二抗后再加TMB避光顯色后進行吸光值檢測。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，使用蒿屬植物對應的nsLTP過敏原標準品進行檢測得到吸光值后繪制標準曲線，將待檢測的蒿屬植物花粉樣品檢測得到的吸光值代入標準曲線計算得到相應濃度。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，北艾用rArt v 3.0201標準品，黃花蒿或細裂葉蓮蒿用nArt an 3標準品，艾蒿或野艾蒿用nArt ar 3標準品，茵陳蒿用nArt ca 3標準品，大籽蒿用nArt si 3標準品。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，rArt v 3.0201標準品的最低檢測閾值為0.25ng/ml，最佳濃度測定范圍為2-128ng/ml；nArt an 3標準品的最低檢測閾值為0.25ng/ml，最佳濃度測定范圍為2-128ng/ml；nArt ar 3標準品的最低檢測閾值為2ng/ml，最佳濃度測定范圍為4-128ng/ml；nArt ca 3標準品的最低檢測閾值為0.5ng/ml，最佳濃度測定范圍為4-128ng/ml；nArt si 3標準品的最低檢測閾值為1ng/ml，最佳濃度測定范圍為8-256ng/ml。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，一抗和二抗的使用濃度均為3μg/ml。