[發明專利]一種多層包被益生菌微膠囊的制備方法

有效

• 申請號: 202011208280.7
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112544977B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 李愛科;王薇薇;陳麗仙;喬琳;宋丹;王麗
• 申請（專利權）人: 國家糧食和物資儲備局科學研究院
• 主分類號: C12N11/00
• 分類號: C12N11/00;A23L33/135;A23K10/18;A23K40/30;A23P10/30;A23P20/18;A61K9/50;A61K35/744;A61K35/747;A61K47/46;A61P1/00
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

本發明公開了一種多層包被益生菌微膠囊的制備方法。該制備方法包括對益生菌進行微囊化前包被和發酵后包被，從而制備多層復合包被益生菌微膠囊的方法。本發明的制備方法對維持益生菌制劑的存活和穩定起到很大的作用。此外，本發明的制備方法可以更方便的實現益生菌微囊化產品的規模化生產，適應于飼料、食品、醫藥等多個領域益生菌微膠囊的制備。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域。更具體地，涉及一種多層包被益生菌微膠囊的制備方法。

背景技術

益生菌活菌制劑功能的發揮主要依靠其所含活菌的生命活動，因此其中活菌含量的高低、活菌活力的強弱以及保質期長短是評價產品質量好壞的關鍵因素。目前國內外研究人員都把維持益生菌制劑的存活和穩定作為質量評價的標準。為了解決益生菌在使用上存活率低，不穩定的問題，利用微膠囊包埋技術保護益生菌已成為目前國內外研究的熱點。但是，目前已有的微膠囊包被技術和產品大多數存在表面多孔的問題，特別是單層微膠囊會存在500～900納米的孔徑，穩定性欠佳，進入人或動物消化道后大多數難以承受低pH值的胃酸、膽汁酸及胰液等的作用；應用到畜禽飼料中，難以抵擋飼料制粒的高溫高壓沖擊；同時單層包被處理的微膠囊在膜的形態穩定性上依然無法滿足要求。另外，有些技術流程不適合大規模生產，嚴重影響了所包被益生菌的活性及其產品的產業化和應用。

因此，需要研發一種對維持益生菌制劑的存活和穩定有很大作用的微膠囊的制備方法，且可以更方便的實現益生菌微囊化產品的規模化生產，適應于飼料、食品、醫藥等多個領域益生菌微膠囊的制備。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足之處，提供一種抗逆性好、制備穩定性佳、且適合工業化生產的多層包被益生菌微膠囊的制備方法。

本發明的另一個目的在于提供一種上述方法制備的多層包被益生菌微膠囊，及其在飼料、食品或醫藥領域中的應用。

為達到上述目的，本發明采用下述技術方案：

第一方面，本發明提供一種多層包被益生菌微膠囊的制備方法，該方法包括：

(1)在發酵系統的補料罐中配制濃度為10g/L-20g/L的海藻酸鈉溶液；

(2)按與所述海藻酸鈉質量比為1:1-1.5的比例稱取碳酸鈣，加入補料罐中，混合均勻，滅菌，然后冷卻至35℃-38℃，加入對數生長末期的益生菌種子液，至益生菌密度為1×10⁶-5×10⁶cfu/ml，充分混勻作為水相；

(3)向液體石蠟中加入司盤80作為油相，所述司盤80的體積百分含量為0.1％-0.3％，并將油相加入到發酵罐中，滅菌；

(4)在另一補料罐中配制0.1-0.3mol/L的氯化鈣溶液作為沉降劑，滅菌；

(5)在400-500rpm的攪拌速度下，按照水相與油相的體積比為1:3-5的比例，將水相混合液緩慢轉入發酵罐的油相中，攪拌2-5min，然后按冰醋酸與油相體積比為1:500-600的比例加入冰醋酸，固定化10-20min，停止攪拌，再按與水相體積比1:10-20的比例向反應體系中加入沉降劑，微膠囊緩慢沉降，再吸走油相；

(6)將適于益生菌生長的培養基加入到發酵罐中，在35-38℃，攪拌速度為50-100rpm條件下，流加氨水控制發酵液pH值為6.2-6.9，繼續培養8-22h，直至益生菌充滿微膠囊內部80％以上的空間，離心，得到單層微膠囊菌泥；

(7)將所述單層微膠囊菌泥加入到殼聚糖酸性緩沖液中充分混合，進行成膜反應，得到雙層微膠囊菌泥；