[發明專利]一種多層包被益生菌微膠囊的制備方法

有效

• 申請號: 202011208280.7
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112544977B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 李愛科;王薇薇;陳麗仙;喬琳;宋丹;王麗
• 申請（專利權）人: 國家糧食和物資儲備局科學研究院
• 主分類號: C12N11/00
• 分類號: C12N11/00;A23L33/135;A23K10/18;A23K40/30;A23P10/30;A23P20/18;A61K9/50;A61K35/744;A61K35/747;A61K47/46;A61P1/00
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

1.一種多層包被益生菌微膠囊的制備方法，其特征在于，該方法包括：

(1)在發酵系統的補料罐中配制濃度為10g/L-20g/L的海藻酸鈉溶液；

(2)按與所述海藻酸鈉質量比為1:1-1.5的比例稱取碳酸鈣，加入補料罐中，混合均勻，滅菌，然后冷卻至35℃-38℃，加入對數生長末期的益生菌種子液，至益生菌密度為1×10⁶-5×10⁶cfu/ml，充分混勻作為水相；

(3)向液體石蠟中加入司盤80作為油相，所述司盤80的體積百分含量為0.1％-0.3％，并將油相加入到發酵罐中，滅菌；

(4)在另一補料罐中配制0.1-0.3mol/L的氯化鈣溶液作為沉降劑，滅菌；

(5)在400-500rpm的攪拌速度下，按照水相與油相的體積比為1:3-5的比例，將水相混合液緩慢轉入發酵罐的油相中，攪拌2-5min，然后按冰醋酸與油相體積比為1:500-600的比例加入冰醋酸，固定化10-20min，停止攪拌，再按與水相體積比1:10-20的比例向反應體系中加入沉降劑，微膠囊緩慢沉降，再吸走油相；

(6)將適于益生菌生長的培養基加入到發酵罐中，在35-38℃，攪拌速度為50-100rpm條件下，流加氨水控制發酵液pH值為6.2-6.9，繼續培養8-22h，直至益生菌充滿微膠囊內部80％以上的空間，離心，得到單層微膠囊菌泥；

(7)將所述單層微膠囊菌泥加入到殼聚糖酸性緩沖液中進行成膜反應，得到雙層微膠囊菌泥；

(8)在步驟(7)得到的雙層微膠囊菌泥中加入保護劑，混勻后，再加入包材溶液，在制粒機中制得20-30目微膠囊母粒；其中，所述保護劑的組成為：以雙層微膠囊菌泥的重量為100份計，向雙層微膠囊菌泥中加入甘油5-10份、海藻糖5-10份、脫脂奶粉0.5-1份、乙酸鈉0.5-1份、玉米淀粉100-300份；所述包材溶液的組成為：以雙層微膠囊菌泥的重量為100份計，向雙層微膠囊菌泥中加入黃原膠0.5-1份、羧甲基纖維素鈉0.001-0.005份、微晶纖維素0.2-0.8份、水100-200份；

(9)將步驟(8)制得的微膠囊母粒轉入流化造粒包衣干燥機中，控制進風溫度為40-55℃，控制出風溫度為30-40℃，干燥至樣品含水量為10-20％，采用腸溶性包衣材料對其進行噴涂，形成包衣，將干燥、包衣后的樣品用雙層篩過篩，得到粒徑為20-60目的多層包被益生菌微膠囊。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述益生菌為乳酸菌或酵母菌。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述乳酸菌為乳桿菌類、雙歧桿菌類或革蘭式陽性球菌中的一種或幾種。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述乳酸菌為植物乳桿菌、屎腸球菌、糞腸球菌、羅氏乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌中的一種或幾種。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(7)中，所述殼聚糖酸性緩沖液是將分子量為300-500kDa的殼聚糖配制成質量濃度為0.2-0.5％的殼聚糖水溶液，并調節水溶液的pH值為4.5-5.5。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(9)中，所述腸溶性包衣材料是質量百分含量為20％-40％的聚丙烯酸樹脂乳膠液。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(9)中，所述腸溶性包衣材料和微膠囊母粒的質量比為1:4-10，以25-50mL/min速度噴涂所述微膠囊母粒。

8.如權利要求1-7任一所述的制備方法制備的多層包被益生菌微膠囊。

9.如權利要求8所述的多層包被益生菌微膠囊在制備飼料、食品或醫藥產品中的應用。