[發明專利]一種增強型溶瘤腺病毒及其應用

在審

• 申請號: 202011195219.3
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN114438128A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 周東明;周萍;張琰;朱彩紅
• 申請（專利權）人: 上海市公共衛生臨床中心
• 主分類號: C12N15/861
• 分類號: C12N15/861;C12N15/64;C12N7/01;A61K48/00;A61K35/761;A61P35/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

本發明提供了一種增強型溶瘤腺病毒及其應用。在黑猩猩型腺病毒AdC68基礎上，本發明人結合該病毒的自身特點以及免疫檢查點的特點，建立了一種復合型溶瘤腺病毒。該復合型溶瘤腺病毒特異性、靶向性好和安全性好，可實現瘤內給藥的給藥方式、避免全身性給藥，可在達到高效抗腫瘤效果的同時減弱毒副反應，降低用藥量或用藥成本。同時，該復合型溶瘤腺病毒可以極為顯著地抑制腫瘤、殺傷能力強。

技術領域

本發明屬于生物醫學以及病毒學領域，更具體地，本發明涉及一種增強型溶瘤腺病毒及其應用。

背景技術

惡性腫瘤已經成為嚴重威脅全球人群健康的主要公共衛生問題之一。世界衛生組織在《2020世界癌癥報告》中顯示，在未來20年，全世界的癌癥病例數可能會增加60％，而對于中低收入國家，可能會高達81％。且近十幾年來惡性腫瘤的發病死亡均呈持續上升態勢，每年惡性腫瘤所致的醫療花費超過2200億，防控形勢嚴峻。

在目前的癌癥治療手段中，免疫療法受到越來越多的關注，不同于傳統的手術、放療、化療和靶向藥物對腫瘤的直接殺傷作用，免疫療法是通過激活機體自身的免疫系統，利用免疫系統的抗腫瘤作用而消滅腫瘤細胞，具有療效好，副作用小和防止復發等優點，是繼傳統化療藥物、靶向治療后腫瘤治療的第三次革命。免疫檢查點單抗藥物Nivolumab(Opdivo)、Pembrolizumab(Keytruda)、Atezolizumab(Tecentriq)、Avelumab(Bavencio)、Durvalumab(Im-finzi)和Cemiplimab(Libtayo)獲FDA批準上市，為癌癥病人帶來了新的希望。而目前獲批的PD-1/PD-L1抑制劑Nivolumab(Opdivo)、Pembrolizumab(Keytruda)等只能針對表達一定程度PD-L1的腫瘤，對于不表達或者表達較少PD-L1的“冷”腫瘤無能為力。且由于腫瘤的異質性，免疫原性低，沒有足夠的腫瘤浸潤T細胞等原因使得部分腫瘤患者對這一療法不能產生良好免疫應答。因此，開發多靶點、不同抗癌機制的藥物聯用有望改善這一問題。近期，各種免疫檢查點抑制劑聯合治療，聯合溶瘤病毒，放化療，抗血管生成類藥物等策略已在臨床開展試驗。

在腫瘤的治療領域中，聯合用藥是較為普遍的做法，通過給予多種化療藥物來共同發揮抑制腫瘤的作用，這雖然提高了療效，但往往給藥方案復雜，也加重了免疫相關不良事件和毒性反應，如皮疹，心肌炎，食道炎，肺間質損傷及神經系統性毒性等。且現實中由于抑制劑抗體藥物價格昂貴，而且需要多次給藥，在系統性使用時達到腫瘤局部的有效劑量被削弱，使大部分患者望而卻步。

隨著本領域中對腫瘤免疫調控機制的深入研究，免疫療法的崛起為腫瘤治療帶來新的方向。其中CAR-T，免疫檢查點抑制劑備受矚目，實現了科研轉化到臨床應用的蛻變，取得了一定的成就。但大部分腫瘤對單藥治療響應率低于30％，不同抗癌機制的藥物聯合用藥雖然提高了療效，但加重了免疫相關不良事件和毒性反應。且由于藥價昂貴，加重了經濟負擔，使大部分患者望而卻步。

因此，在腫瘤的治療領域中，亟待一些優化的腫瘤用藥制劑以及新型療法，以期進一步提高用藥的便利度和有效性，以及降低用藥的副作用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種增強型溶瘤腺病毒及其應用。

在本發明的第一方面，提供一種制備溶瘤腺病毒載體的方法，包括以黑猩猩型腺病毒AdC68基因組為基礎的序列，且改造其E1序列、E3序列，所述改造包括：(1)在E1區刪除E1B部分序列，且利用survivin啟動子驅動E1A的表達；和，(2)刪除E3區部分序列，且在E3區引入抗PD-1抗體的表達盒。

在本發明的另一方面，提供一種溶瘤腺病毒載體，包括以黑猩猩型腺病毒AdC68基因組為基礎的序列，其中E1序列、E3序列被改造，所述改造包括：(1)在E1區刪除E1B部分序列，且利用survivin啟動子驅動E1A的表達；和，(2)刪除E3區部分序列，且在E3區引入抗PD-1抗體的表達盒。