[發明專利]一種利用核磁氫譜或氘譜測定氘標記化合物的氘同位素豐度的方法

有效

• 申請號: 202011190268.8
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112305007B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 解龍;雷雯;宋明鳴
• 申請（專利權）人: 上海化工研究院有限公司
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 劉燕武

本發明涉及一種利用核磁氫譜或氘譜測定氘標記化合物的氘同位素豐度的方法，包括以下步驟：(1)稱取氘標記化合物、內標物和氘代溶劑裝入核磁管中；(2)再將核磁管放入核磁儀器的進樣器中，運行并進樣測試；(3)對測試后的核磁圖譜進行峰面積積分，并根據積分后的峰面積計算得到氘標記化合物的氘同位素豐度。與現有技術相比，本發明操作過程簡單，適用范圍廣泛，測試數據準確。

技術領域

本發明屬于氘同位素豐度技術領域，涉及一種利用核磁氫譜或氘譜測定氘標記化合物的氘同位素豐度的方法。

背景技術

穩定同位素氘標記試劑是科研工作中必不可少的試劑，除了大量用于核磁溶劑外，氘標記化合物也被廣泛地應用于蛋白質組學(氘標記氨基酸類，用于SILAC定量檢測等)、新生兒代謝遺傳病篩查(氘標記肉堿等化合物)、氘標記藥物(2017年氘標記丁苯那嗪(SD-809)獲得FDA批準上市)、食品安全(農獸藥物殘留檢測用氘標記內標試劑)、分子砌塊(氘標記基礎試劑用于新藥與定制試劑的研發)和現代農業(氘標記茉莉酸等內源植物激素)等領域。

目前，氘標記化合物同位素豐度檢測方法主要有穩定同位素比值質譜法、氣相色譜法、紅外光譜法、拉曼光譜法、質譜法和核磁共振波譜法，前四種適用范圍相對狹窄，質譜法是目前最常用的測試手段。然而，由于化合物的極性、沸點等性質各不相同，仍有一些化合物通過常規的質譜法是無法準確計算。與質譜法相比，核磁可以準確的反映出氘原子所處的化學環境和氘原子的結構位點信息。這一特性為研究開發多位點氘標記化合物提供位點信息的技術支持。

核磁共振波譜法主要是利用定量核磁共振技術(Quantitative NuclearMagnetic Resonance，qNMR)，qNMR是采用內標法通過譜峰的積分面積來測得氘標記化合物中氫(¹H)的含量，進而求得氘標記化合物的同位素豐度，同時也可以獲得氘標記位點的信息。

Goldblatt M等人(Goldblatt M,Jones W H.DETERMINATION OF THE DEUTERIUMCONTENT OF A SAMPLE OF DEUTERIUM OXIDE BY THREE METHODS[J].AnalyticalChemistry,1964,36(2):431-432.)在1964年利用¹H NMR對重水進行了氘同位素豐度的檢測，僅僅只是證實了核磁可以進行氘同位素豐度測試，未給出具體測試條件。Ma X,Deng等人[Ma X,Deng P,Wang X,et al.Direct determination of deuterium of wideconcentration range in water by Nuclear Magnetic Resonance[J].Talanta,2012:450-455.]在2012年利用¹H NMR或²H NMR同樣對重水進行了氘同位素豐度的檢測，氘同位素豐度范圍從自然豐度(0.015atom％D)到100％，回收率在95％～110％，實現了重水的快速檢測。通過檢索發現，現有的氘同位素豐度核磁共振檢測方法主要圍繞著重水進行展開的，利用已知的氘同位素豐度值與測得的相對峰面積進行線性擬合得出校準曲線，將被測物測試的相對峰面積帶入校準曲線即可求出氘同位素豐度值，主要采用的是相對定量法，同時內標物的選擇比較單一，在更換內標物或被測物時，檢測方法需要重新優化，并未研究不同的內標物對定量結果的影響。

發明內容

本發明的目的就是為了提供一種利用核磁氫譜或氘譜測定氘標記化合物的氘同位素豐度的方法，以簡化測試過程，提高測試數據準確度和適用范圍。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種利用核磁氫譜或氘譜測定氘標記化合物的氘同位素豐度的方法，包括以下步驟：

(1)稱取氘標記化合物、內標物和氘代溶劑裝入核磁管中；

(2)再將核磁管放入核磁儀器的進樣器中，運行并進樣測試；