[發明專利]一種利用層生鐮刀菌發酵轉化黃芪甲苷制備環黃芪醇的方法

在審

• 申請號: 202011184825.5
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN114438158A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 張鵬;潘弘哲;陳毅明
• 申請（專利權）人: 廈門北化生物產業研究院有限公司
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;C12P33/06;C07J53/00;C12R1/77
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.利用篩選出的菌種層生鐮刀菌(Fusarium proliferatum 0821 CGMCC No.16482)，以黃芪甲苷為底物，通過發酵，制得環黃芪醇。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)種子培養

將保存的菌種Fusarium proliferatum接入100mL裝有麥芽汁培養基的錐形瓶中，在25-30℃、150-200r/min的條件下培養36-48h，獲得種子液。

(2)轉化培養

將步驟(1)培養的種子液按10％的接種量接入100mL裝有發酵培養基的錐形瓶中，在25-30℃、150-200r/min的條件下培養6天，獲得發酵液。

(3)分離純化

將步驟(2)所得的發酵液經水飽和正丁醇等體積萃取三次后真空濃縮蒸干得到萃取產品，進一步利用硅膠柱層析分離純化，最終通過乙醇重結晶將產品的純度提高到95％以上，得到環黃芪醇產品。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟(2)中的發酵培養基的組成為：黃芪粉2g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉2g/L，K2HPO4 1g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，黃芪甲苷底物0.2g/L。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：發酵培養基配方中的黃芪粉是80目的黃芪粉，是直接將洗凈的黃芪根莖粉碎制成，黃芪甲苷底物的純度為50％-100％。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟(3)中的硅膠柱層析填料為100-200目硅膠粉，洗脫劑為體積比例分別為13∶6∶2的甲醇-氯仿-水的下層溶液。