[發(fā)明專利]一種基于單克隆抗體制備的鐵調(diào)素的膠乳增強比濁法檢測試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011184220.6 | 申請日： | 2020-10-29 |
| 公開（公告）號： | CN112345772A | 公開（公告）日： | 2021-02-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 卞正虹;王斌;李秀艷 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇沃興生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/74 | 分類號： | G01N33/74;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/531;C07K16/26 |
| 代理公司： | 南京創(chuàng)略知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32358 | 代理人： | 呂娟 |
| 地址： | 212000 江蘇省鎮(zhèn)江市新*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 單克隆抗體 制備 鐵調(diào)素 膠乳 增強 檢測 試劑盒 | ||
1.一種基于單克隆抗體制備的鐵調(diào)素的膠乳增強比濁法檢測試劑盒，其特征在于：該試劑盒的組分包括交聯(lián)混合HEPCIDIN1-3單克隆抗體的膠乳微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于單克隆抗體制備的鐵調(diào)素的膠乳增強比濁法檢測試劑盒，其特征在于：所述交聯(lián)混合HEPCIDIN1-3單克隆抗體的膠乳微球為：
將人HEPCIDIN蛋白基因序列切割為三段，分別通過表達載體導(dǎo)入表達菌中進行表達；然后將表達產(chǎn)物純化和鑒定后免疫小鼠，待免疫達到指定抗體水平后無菌取脾臟，制備雜交瘤細胞；培養(yǎng)篩選雜交瘤，獲得三種HEPCIDIN單克隆抗體，然后分別將該三種HEPCIDIN單克隆抗體與聚苯乙烯膠乳微球交聯(lián)，獲得三種交聯(lián)抗人HEPCIDIN單克隆抗體膠乳微球的混合物，即為交聯(lián)混合HEPCIDIN1-3單克隆抗體的膠乳微球。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于單克隆抗體制備的鐵調(diào)素的膠乳增強比濁法檢測試劑盒，其特征在于：所述將人HEPCIDIN蛋白基因序列切割為三段，該三段基因序列之間有交叉，具體如下：
第一段序列為：
ACCAGAGCAAGCTCAAGACCCAGCAGTGGGACAGCCAGACAGACGGCACGATGGCACTGAGCTCCCAGATCTGGGCCGCTTGCCTCCTGCTCCTCCTCCTCCTCGCCAGCCTGACCAGTGGCTCTGTTTTCCCACAACAGACGGGACAACTTGCAGAGCTGCAACCCCAGGACAGAGCTGGAGCCAGGGCCAGCTGGATGCCCATGTTCCAGAGGCGAAGGAGGCGAGACACCCACTTCCCCATCTGCATTTTCTGCTGCG
第二段序列為：
CCTGCTCCTCCTCCTCCTCGCCAGCCTGACCAGTGGCTCTGTTTTCCCACAACAGACGGGACAACTTGCAGAGCTGCAACCCCAGGACAGAGCTGGAGCCAGGGCCAGCTGGATGCCCATGTTCCAGAGGCGAAGGAGGCGAGACACCCACTTCCCCATCTGCATTTTCTGCTGCGGCTGCTGTCATCGATCAAA
第三段序列為：
AAGGAGGCGAGACACCCACTTCCCCATCTGCATTTTCTGCTGCGGCTGCTGTCATCGATCAAAGTGTGGGATGTGCTGCAAGACGTAGAACCTACCTGCCCTGCCCCCGTCCCCTCCCTTCCTTATTTATTCCTGCTGCCCCAGAACATAGGTCTTGGAATAAAATGGCTGGTTCTTTTGTTTTCCAAA。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于單克隆抗體制備的鐵調(diào)素的膠乳增強比濁法檢測試劑盒，其特征在于：所述交聯(lián)混合HEPCIDIN1-3單克隆抗體的膠乳微球制備方法包括如下步驟：
S1： 重組人HEPCIDIN1-3蛋白的制備
將人HEPCIDIN蛋白基因序列切割為三段，分別通過表達載體導(dǎo)入表達菌中進行表達，獲得重組人HEPCIDIN1-3粗制品，將該重組人HEPCIDIN1-3粗制品純化，獲得重組人HEPCIDIN1-3蛋白；
S2： HEPCIDIN1-3單克隆抗體的制備
將步驟S1制備的重組人HEPCIDIN1-3蛋白注射小鼠對其免疫，待免疫達到指定抗體水平后，取小鼠脾臟細胞制備雜交瘤細胞，并培養(yǎng)雜交瘤細胞獲得HEPCIDIN1-3單克隆抗體；
S3：交聯(lián)混合HEPCIDIN1-3單克隆抗體的膠乳微球的制備
將步驟S2制備的HEPCIDIN1-3單克隆抗體與直徑100~300nm的聚苯乙烯膠乳微球采用化學(xué)交聯(lián)法交聯(lián)，獲得交聯(lián)混合HEPCIDIN1-3單克隆抗體的膠乳微球。
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