[發明專利]一種同時測定血漿中6種一線抗結核藥物及抗真菌藥物伏立康唑血藥濃度的方法

在審

• 申請號: 202011178860.6
• 申請日: 2020-10-29
• 公開（公告）號: CN112326824A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 趙冠人;陳明;車玲;彭明麗;孟瑾;吳漫
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院第八醫學中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 黃燕

1.一種同時測定血漿中6種一線抗結核藥物及抗真菌藥物伏立康唑血藥濃度的方法，其特征在于，其包括：

所述6種一線抗結核藥物為異煙肼、利福平、利福噴丁、乙胺丁醇、吡嗪酰胺和左氧氟沙星，所述抗真菌藥物為伏立康唑；

將所述6種一線抗結核藥物和所述抗真菌藥物的對照品分別加甲醇溶解配制成7種不同梯度濃度的對照品溶液，隨后分別將7種對照品溶液與內標對乙酰氨基酚儲備液混合后，加入蛋白沉淀劑沉淀，取上清液在高效液相色譜質譜聯用設備上進樣分析，以藥物濃度為橫坐標，以藥物峰面積和內標峰面積的比值為縱坐標，計算回歸方程作為標準曲線；

向臨床血漿樣本中加入內標對乙酰氨基酚儲備液，加入蛋白沉淀劑沉淀，取上清液在高效液相色譜質譜聯用設備上進樣分析，根據標準曲線計算臨床血漿樣本中各藥物濃度；

液相色譜參數為：

流動相：流動相A為體積濃度為0.1-0.3％的醋酸水溶液，流動相B為甲醇和乙腈的混合溶液，采用梯度洗脫，洗脫程序為：

0-2.5min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為92-98％→80-86％：2-8％→14-20％；2.5-5min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為71-77％→42-48％：23-29％→52-58％；5-7.3min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為42-48％：52-58％；7.3-10min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為27-33％：67-73％；10-13min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為92-98％：2-8％。

2.根據權利要求1所述的同時測定血漿中6種一線抗結核藥物及抗真菌藥物伏立康唑血藥濃度的方法，其特征在于，洗脫程序為：

0-2.5min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為92-95％→80-83％：5-8％→17-20％；2.5-5min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為71-74％→42-45％：26-29％→55-58％；5-7.3min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為42-45％：55-58％；7.3-10min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為27-30％：70-73％；10-13min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為92-95％：5-8％。

3.根據權利要求1所述的同時測定血漿中6種一線抗結核藥物及抗真菌藥物伏立康唑血藥濃度的方法，其特征在于，洗脫程序為：

0-2.5min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為95％→83％：5％→17％；2.5-5min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為74％→45％：26％→55％；5-7.3min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為45％：55％；7.3-10min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為30％：70％；10-13min時，所述流動相A和所述流動相B的比例為95％：5％。

4.根據權利要求1-3任一項所述的同時測定血漿中6種一線抗結核藥物及抗真菌藥物伏立康唑血藥濃度的方法，其特征在于，所述流動相B中甲醇和乙腈的體積比為1:0.5-1.5。

5.根據權利要求1-3任一項所述的同時測定血漿中6種一線抗結核藥物及抗真菌藥物伏立康唑血藥濃度的方法，其特征在于，色譜柱為Agilent Poroshell 120SBC₁₈柱；

優選地，流速為0.3-0.7mL/min；

優選地，進樣量為5-10uL。