[發(fā)明專利]一種用馬來氏網(wǎng)結(jié)合高通量測序調(diào)查昆蟲多樣性的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011177924.0
• 申請日: 2020-10-29
• 公開（公告）號: CN112293381B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊曉飛;曹權(quán);胡安捷;莫育盆
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州大學(xué)
• 主分類號: G16B30/00
• 分類號: G16B30/00;A01M1/20;A01M1/10
• 代理公司: 昆明合盛知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 53210
• 代理人: 龍燕

本發(fā)明公開一種用馬來氏網(wǎng)結(jié)合高通量測序調(diào)查昆蟲多樣性的方法，屬于昆蟲多樣性研究技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所述方法為先通過馬來式網(wǎng)收集昆蟲，然后對收集的全部昆蟲進(jìn)行總DNA的提取，后通過高通量測序技術(shù)獲得所有昆蟲的DNA序列，經(jīng)NCBI Blast數(shù)據(jù)庫進(jìn)行序列比對，從而對所獲得昆蟲進(jìn)行鑒定。通過Alpha多樣性和Beta多樣性來分析各收集點(diǎn)昆蟲的群落結(jié)構(gòu)、多樣性及優(yōu)勢物種。本發(fā)明所述方法可以對油茶林、茶園進(jìn)行昆蟲多樣性的實(shí)時(shí)、有效及全面的調(diào)查，以便掌握害蟲發(fā)生動態(tài)及害蟲與天敵間的關(guān)系。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用馬來氏網(wǎng)結(jié)合高通量測序調(diào)查昆蟲多樣性的方法，屬于昆蟲多樣性研究技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

昆蟲多樣性作為生物多樣性的重要組成部分，在維持生態(tài)平衡、生物防治、植物傳粉、醫(yī)藥保健和輕工業(yè)原料等方面發(fā)揮著重要作用；在我國建立的保護(hù)區(qū)中，昆蟲是可以有效利用的寶貴資源，但是它同時(shí)也是危害農(nóng)林生產(chǎn)重要的一部分，需要重點(diǎn)的關(guān)注和防范，了解景區(qū)昆蟲區(qū)系的組成和分布情況，有利于開展研究和保護(hù)項(xiàng)目；現(xiàn)有技術(shù)有很多的昆蟲收集方法與鑒定技術(shù)。

昆蟲的收集方法主要取決于采樣對象和采樣環(huán)境的不同，還要考慮到人力和經(jīng)費(fèi)問題。可供選擇的采樣方法有很多，在此例舉一些常見的陸地昆蟲采集方法，針對一些特殊生境生活的昆蟲，需要根據(jù)不同的情采用特殊的采集方法。比如，(1)燈光誘捕夜晚趨光性的昆蟲(主要是鱗翅目)；(2)掃集法，特制的掃網(wǎng)接觸植被，適于捕捉植被中的昆蟲；(3)網(wǎng)集法，使用捕蟲網(wǎng)捕捉昆蟲的最常用的方法；(4)吸蟲器法適用于寄生蜂多樣性的研究和系統(tǒng)監(jiān)測；(5)振頻式殺蟲燈，殺蟲種類廣，可誘殺多種蔬菜害蟲(6)馬來氏網(wǎng)，收集日出性和部分夜出性膜翅目和雙翅目昆蟲，主要靠攔截具有向光性的飛行昆蟲，并引導(dǎo)其向上爬入收集瓶來完成誘集。

昆蟲的鑒定技術(shù)大致分為形態(tài)鑒定和DNA分子鑒定；形態(tài)鑒定是通過昆蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)與特征進(jìn)行鑒定，DNA分子鑒定有第二代測序技術(shù)、高通量測序技術(shù)等。第二代測序技術(shù)主要是個(gè)體的測序鑒定；高通量測序技術(shù)，高通量技術(shù)可對數(shù)百萬個(gè)DNA分子進(jìn)行同時(shí)測序鑒定。

現(xiàn)有大部分的昆蟲多樣性研究都是先在研究地進(jìn)行昆蟲的收集，其后利用形態(tài)鑒定的方法分析多樣性，如物種豐富度指數(shù)、多樣性指數(shù)、均勻度、物種優(yōu)勢度等。現(xiàn)有技術(shù)多利用形態(tài)鑒定昆蟲種類，鑒定方法比較原始會浪費(fèi)大量時(shí)間在鑒定上，并且鑒定不準(zhǔn)確。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種用馬來氏網(wǎng)結(jié)合高通量測序調(diào)查昆蟲多樣性的方法，可實(shí)現(xiàn)大尺度、實(shí)時(shí)有效的昆蟲多樣性監(jiān)測，迅速掌握害蟲的發(fā)生動態(tài)，具體包括以下步驟：

(1)針對實(shí)施地點(diǎn)面積布點(diǎn)，設(shè)計(jì)25m*25m的樣方，在每個(gè)樣方的中心點(diǎn)安放一個(gè)馬來氏網(wǎng)；馬來氏網(wǎng)的主要部件收集瓶分為上下兩個(gè)部分，上部與網(wǎng)體聯(lián)通，下部裝3/4無水乙醇，每14天收集一次昆蟲，重新更換無水乙醇。