[發(fā)明專利]一種驗(yàn)證內(nèi)生共生菌的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011172513.2
• 申請(qǐng)日: 2020-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112352640A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 道仁圖雅;李燕;王琦;孟俊紅;梅汝鴻
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 錢康（北京）科技有限公司
• 主分類號(hào): A01G22/22
• 分類號(hào): A01G22/22;A01G7/06;A01G7/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種驗(yàn)證內(nèi)生共生菌的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1：驗(yàn)證內(nèi)生共生菌的裝置；

基礎(chǔ)裝置：由玻璃廣口瓶，上有玻璃鐘罩，玻璃廣口瓶，瓶口置放塑料瓶塞；

備用材料：可嚴(yán)密封閉廣口瓶瓶口的凡士林等物質(zhì)；用于鐘罩內(nèi)抽氣的干燥機(jī)；

S2：培育無(wú)菌的水稻菌；

將水稻種籽進(jìn)行沖洗，然后用無(wú)菌水清洗三次；

S3：供試菌株進(jìn)行放射雙抗處理：將供試菌株用鈷60放射處理，將供試菌株在抗生素鏈霉素利福平中，從低濃度逐漸培育成抗兩種抗菌素濃度達(dá)200ppm；

S4：將無(wú)菌稻苗置放在經(jīng)過(guò)消毒的廣口瓶?jī)?nèi)，將含有營(yíng)養(yǎng)液的供試放射標(biāo)志抗兩種抗菌素的芽孢桿菌加在廣口瓶?jī)?nèi)，營(yíng)養(yǎng)菌液溢過(guò)水稻根部；

S5：將供試廣口瓶瓶口嚴(yán)密密閉，避免出現(xiàn)水膜存在，避免廣口瓶?jī)?nèi)的芽孢桿菌絕從下部通過(guò)莖桿表面通過(guò)瓶塞傳到瓶塞上部；

S6：瓶塞上部鐘罩內(nèi)，進(jìn)行抽氣干燥，不允許上部莖葉有任何水膜存在，不允許有任何供試菌在莖葉表面有水膜存在；

S7：五天后，在供試水稻苗頂端葉尖上可檢查供試芽孢桿菌。

(1)放射雙抗芽孢桿菌共有鈷60放射標(biāo)志并且在200ppm鏈霉素利福平兩種抗生素培養(yǎng)的試劑上生長(zhǎng)；

(2)本試驗(yàn)設(shè)將供應(yīng)菌殺死后，做對(duì)照。對(duì)照在上部葉尖處沒(méi)有放射性標(biāo)志，并抗兩種抗素菌的芽孢桿菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種驗(yàn)證內(nèi)生共生菌的方法，其特征在于：在所述S2步驟中，清洗后的水稻種籽置放無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)液中室溫培養(yǎng)成苗，備用。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種驗(yàn)證內(nèi)生共生菌的方法，其特征在于：在所述S3步驟中供試菌株是芽孢桿菌。