[發明專利]一種雞骨常山種苗的組培快繁和離體保存方法有效
| 申請號： | 202011172234.6 | 申請日： | 2020-10-28 |
| 公開（公告）號： | CN112119915B | 公開（公告）日： | 2021-11-19 |
| 發明（設計）人： | 李春芳;何俊;楊俊波 | 申請（專利權）人： | 中國科學院昆明植物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00;A01N3/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 蘇士瑩 |
| 地址： | 650201 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 常山 種苗 組培快繁 保存 方法 | ||
1.一種雞骨常山種苗的組培快繁和離體保存方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)將消毒后的幼嫩側芽莖段為外植體，將所述外植體轉移至初代培養基上進行初代培養，得無菌新芽；所述初代培養基由MS培養基、6-BA0.5mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖20g/L和瓊脂5.6g/L組成，pH值為5.8；
(2)將所述無菌新芽轉到增殖培養基上繼續培養，得叢生芽；所述增殖培養基由MS培養基、6-BA0.3～1.0mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖20g/L和瓊脂5.6g/L組成，pH值為5.8；
(3)將所述叢生芽切割成單芽后接種于生根培養基上進行生根培養，得生根組培苗；所述生根培養基由1/2MS培養基、IAA0.1～1.0mg/L、蔗糖20g/L和瓊脂5.6g/L組成，pH值為5.8；得到生根組培苗后，待所述生根組培苗生根2～4條、根長2～3cm時進行移栽，所述移栽前還包括煉苗，所述移栽的移栽基質為腐葉土和生紅土的混合基質，所述腐葉土和生紅土的體積比為1： 1；
(4)將所述生根組培苗轉移至離體保存培養基上進行離體保存；所述離體保存培養基由1/2MS培養基、IAA1.0mg/L、蔗糖20g/L和瓊脂5.6g/L組成，pH值為5.8；
步驟(1)所述初代培養、步驟(2)所述繼續培養、步驟(3)所述生根培養和步驟(4)所述離體保存的溫度均為25±3℃，光照強度均為20～40μmol/(m2·s)，光照時間均為12h/d。
2.根據權利要求1所述組培快繁和離體保存方法，其特征在于，步驟(1)所述消毒包括：將幼嫩的側芽莖段浸泡在肥皂水中，經自來水沖洗1h后，于無菌環境中剪成帶單個芽的莖段，用體積百分含量為75％的酒精消毒10s，無菌水沖洗3遍，用質量百分含量為0.1％的升汞溶液進行表面消毒6～8min，無菌水清洗3～5次。
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