[發明專利]啟動子pNtab3450及其表達載體和應用

有效

• 申請號: 202011171416.1
• 申請日: 2020-10-28
• 公開（公告）號: CN112280779B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 丁安明;陳志華;楊興有;余祥文;王衛鋒;孫玉合
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院煙草研究所;中國煙草總公司四川省公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/82
• 代理公司: 青島清泰聯信知識產權代理有限公司 37256
• 代理人: 張潔

本發明提出一種啟動子pNtab3450及其表達載體和應用，屬于基因工程領域。本發明提供的啟動子pNtab3450由1500個核苷酸組成，其序列任選自如下(a)、(b)或(c)所述的序列之一：(a)序列表SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；(b)與序列表SEQ ID NO:1具有75％以上一致性，且具有啟動子功能的核苷酸序列；(c)在高嚴謹條件下與(a)或(b)所述的核苷酸序列雜交且具有啟動子功能的核苷酸序列。本發明提供的誘導型強啟動子可明顯增強抗逆基因在干旱、高鹽和/或ABA的處理條件下的表達水平，在煙草基因工程育種中具有重要的應用價值和很好的開發前景。

技術領域

本發明屬于基因工程領域，尤其涉及一種啟動子pNtab3450及其表達載體和應用，尤其是在培育抗干旱和/或耐高鹽的轉基因植物中的應用。

背景技術

啟動子通過與一種或多種轉錄因子結合而調控基因的表達，其可分為組成型和誘導型兩類。根據誘導因素的差別，啟動子又可分為生物誘導型和非生物誘導型兩類，其中，非生物啟動子又可分為干旱、鹽、低溫、高溫和化學試劑誘導型等多種類型，這些啟動子通常在受到相關理化因素作用時才會啟動或增強下游基因轉錄。因此，利用啟動子可以實現在特定組織、發育階段或特殊環境條件下表達目的基因的目的，具有巨大的應用前景。

近年來，對水稻、玉米、小麥等主要農作物啟動子的報道逐漸增加，體現了人們對越來越嚴重的環境脅迫的重視。隨著啟動子研究的深入，啟動子中一些響應環境脅迫的順式作用元件也陸續被鑒定出來。如響應干旱的元件DRE(A/GCCGAC)元件和響應低溫的CBF(CCGAC)元件、受干旱和鹽脅迫顯著誘導的ABRE(ACGTGG/T)元件等，為啟動子的鑒定提供了理論基礎。

煙草是我國主要的經濟作物之一。隨著現代農業栽培技術的發展，一些經濟作物如花卉、蔬菜、水果的種植面積逐年增加，煙草作為比較經濟效益相對低下的作物漸漸向丘陵與山區等干旱地區集中，有限的耕地和季節性干旱嚴重制約了煙草的種植和發展。然而，當前主栽煙草品種由于持續種植和不良的栽培措施，抗逆性不斷下降。因此，從煙草中鑒定受干旱誘導的啟動子可為培育耐旱煙草品種提供思路和策略，具有重要的應用前景。

發明內容

本發明提供了一種啟動子pNtab3450及其表達載體和應用，該啟動子pNtab3450可有效增強抗逆基因在干旱和/或高鹽處理條件下的表達水平，使得在煙草基因工程育種中具有重要的應用價值。

為了達到上述目的，本發明提供了一種啟動子pNtab3450，所述啟動子pNtab3450由1500個核苷酸組成，其序列任選自如下(a)、(b)或(c)所述的序列之一：

(a)序列表SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

(b)與序列表SEQ ID NO:1具有75％以上一致性，且具有啟動子功能的核苷酸序列；

(c)在高嚴謹條件下與(a)或(b)所述的核苷酸序列雜交且具有啟動子功能的核苷酸序列。

作為優選，所述(b)為與序列表SEQ ID NO:1具有95％以上同源性，且具有啟動子功能的核苷酸序列。

作為優選，所述的誘導為干旱、高鹽和/或ABA的誘導。

本發明還提供了一種表達載體，它是在植物表達載體中插入了如權利要求1所述的如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

作為優選，所述的植物表達載體為pBI101。

本發明還提供了一種如上述技術方案所述的啟動子pNtab3450在以干旱和/或高鹽為選擇壓力的選擇標記方面的應用。

本發明還提供了一種如上述技術方案所述的啟動子pNtab3450在培育抗干旱和/或耐高鹽的轉基因植物的應用，所述的植物為煙草。