[發(fā)明專利]一種吲哚布芬原料藥中基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011171014.1
• 申請(qǐng)日: 2020-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114487141A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張霞;王新月;張璇;張志明;胡方劍;倪振華;謝小燕;陳磊;獨(dú)文娜;譚芳;趙澄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杭州中美華東制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種吲哚布芬原料藥中基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于：所述方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基鍵合硅膠為固定相對(duì)基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行色譜分離，采用質(zhì)譜檢測(cè)儀進(jìn)行分析檢測(cè)；所述流動(dòng)相為溶劑A和溶劑B的混合，所述的溶劑A選自含揮發(fā)性酸的水溶液體系，所述的溶劑B選自含有甲醇、乙腈或兩者混合的任意一種。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的基因毒性雜質(zhì)為2-(4-氨基)苯基丁酸。

3.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述流動(dòng)相的pH控制在2～7之間，優(yōu)選為2～3之間。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的溶劑A選自含有甲酸、乙酸或兩者混合的任意一種的水溶液，進(jìn)一步，所述的溶劑A的體積濃度優(yōu)選為0.01％～1％；再進(jìn)一步，所述的溶劑A優(yōu)選為體積濃度0.01％～1％的乙酸水溶液。

5.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述流動(dòng)相洗脫采用梯度洗脫，所述梯度洗脫條件為：0.01～1min時(shí)等度，溶劑A與溶劑B的體積比為90:10～70:30，2～4min時(shí)等度，溶劑A與溶劑B的體積比為10:90～5:95，4.1～5min時(shí)等度，溶劑A與溶劑B的體積比為90:10～70:30。

6.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的流動(dòng)相的流速為0.3～0.5mL/min。

7.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述色譜柱的規(guī)格為2.1×50mm，1.7μm或4.6×50mm，1.8μm或4.6×50mm，2.7μm。

8.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的方法具體包括：取供試品溶解并稀釋制成濃度約為0.5～1mg/mL的溶液，作為供試品溶液；取基因毒性雜質(zhì)2-(4-氨基)苯基丁酸溶解并稀釋制成濃度約為1.875～3.75ng/mL的溶液，作為對(duì)照品溶液；分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液5～20μL進(jìn)樣，分別記錄定量、定性離子對(duì)下的離子流圖，照外標(biāo)法以定量離子對(duì)峰面積計(jì)算雜質(zhì)含量；所述稀釋劑為初始流動(dòng)相。

9.一種吲哚布芬原料藥中基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于：所述方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基鍵合硅膠為固定相對(duì)基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行色譜分離，采用質(zhì)譜檢測(cè)儀進(jìn)行分析檢測(cè)；所述流動(dòng)相為溶劑C和溶劑D的混合，所述的溶劑C選自揮發(fā)性鹽的水溶液體系，所述的溶劑D選自含有甲醇、乙腈或兩者混合的任意一種。

10.如權(quán)利要求9所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的基因毒性雜質(zhì)為2-(4-氨基)苯基丁酸和/或2-(4-硝基)苯基丁酸。

11.如權(quán)利要求9所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述流動(dòng)相的pH控制在3～7之間，優(yōu)選為6～7之間。

12.如權(quán)利要求9所述的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的溶劑C選自甲酸銨或乙酸銨中的一種或任意幾種的混合的水溶液；進(jìn)一步，所述的溶劑C濃度優(yōu)選為濃度為5～50mmol/L；再進(jìn)一步，所述的溶劑C優(yōu)選為5～50mmol/L的乙酸銨的水溶液。

13.如權(quán)利要求10所述的檢測(cè)方法，其特征在于：?jiǎn)为?dú)檢測(cè)基因毒性雜質(zhì)2-(4-氨基)苯基丁酸時(shí)，所述流動(dòng)相洗脫采用梯度洗脫，洗脫條件為：0.01min時(shí)，溶劑C與溶劑D的體積比為85:15～70:30；2～3min時(shí)等度，溶劑C與溶劑D的體積比為30:70～15:85；3.1～5min時(shí)等度，溶劑C與溶劑D的體積比為85:15～70:30。

14.如權(quán)利要求10所述的檢測(cè)方法，其特征在于：?jiǎn)为?dú)檢測(cè)基因毒性雜質(zhì)2-(4-氨基)苯基丁酸時(shí)，所述的流動(dòng)相的流速為0.9～1.1mL/min。