[發(fā)明專利]一種適用于中國(guó)地區(qū)前交叉韌帶損傷的基因診斷試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011169910.4
• 申請(qǐng)日: 2020-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112094906A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳鴻;姜春巖;史荔;趙文川;劉舒媛;羅廷虎;張啟;楊智敏;郭艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陳鴻
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12Q1/6858
• 代理公司: 成都明濤智創(chuàng)專利代理有限公司 51289
• 代理人: 杜夢(mèng)

1.一種適用于中國(guó)地區(qū)前交叉韌帶損傷的基因診斷試劑盒，其特征在于，包括PCR反應(yīng)體系，所述PCR反應(yīng)體系包含第一引物組和/或第二引物組，所述第一引物組包含如下引物序列：

上游引物：5’-ACGTCACTAAAATAAAATCCTGTCTA-3’；

下游引物：5’-GAAGCTCCAAGAAACCATCC-3’；

所述第二引物組包含如下引物序列：

上游引物COL12-F1 5’-GAG AAT CCA GAA CAG CTC CAC CAG-3’；

下游引物COL12-R1 5’-CAT GGC TAG TAT GGG ACA G-3’。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的適用于中國(guó)地區(qū)前交叉韌帶損傷的基因診斷試劑盒，其特征在于，所述第二引物組還包含以下引物序列：

上游引物COL12-F2 5’-ACT TTT GCG TGG GTA TGT-3’；

下游引物COL12-R2 5'-CTC CAA AAC AAG TAG TAG C-3’。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的適用于中國(guó)地區(qū)前交叉韌帶損傷的基因診斷試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)體系還包括10×PCR擴(kuò)增緩沖液、dNTP、HostStart rTaq聚合酶、模板DNA。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的適用于中國(guó)地區(qū)前交叉韌帶損傷的基因診斷試劑盒，其特征在于，所述試劑盒每一人份包括PCR反應(yīng)體系20μL，其中，PCR反應(yīng)體系包括10×PCR擴(kuò)增緩沖液2.0μL、dNTP1.6μL、上游引物0.2μL、下游引物0.2μL、HostStart rTaq聚合酶0.1μL、模板DNA1.3μL，剩余由無(wú)菌雙蒸水?dāng)U充至20μL；

PCR擴(kuò)增反應(yīng)的條件為：94℃預(yù)變形3min，94℃變性30s，58.9℃退火30s，72℃延伸2min，共30個(gè)循環(huán)，隨后72℃延10min，最后4℃保存。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的適用于中國(guó)地區(qū)前交叉韌帶損傷的基因診斷試劑盒，其特征在于，所述第一引物組針對(duì)β-fib基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)；所述第二引物組中的COL12-F1及COL12-R1、COL12-F2及COL12-R2針對(duì)COL12A1基因外顯子65區(qū)和29區(qū)的多態(tài)性位點(diǎn)。