[發明專利]一種華蓋木組培快繁方法

有效

• 申請號: 202011163595.4
• 申請日: 2020-10-27
• 公開（公告）號: CN112243861B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 羅桂芬;孫衛邦;陶麗丹;葛佳;蔡磊
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 薛紅凡

本發明提供了一種華蓋木組培快繁方法，屬于植物組培技術領域。本發明以消毒的華蓋木幼嫩的頂芽或側芽為外植體，通過在特定的培養基上依次誘導、分化、增殖與生根一系列培養，成功繁殖華蓋木完整植株，有效解決了華蓋木組培快繁、引種馴化、保護及其科研、園林綠化上的開發利用問題，同時有效避免野生資源自然消失與滅亡，維持自然界中種群數量，在華蓋木的遷地保護、近地保護和就地保護所需種苗方面具有積極作用。本方法誘導分化率58％，繁殖周期60天，增殖系數為3.6，生根率為81％，移栽成活率為86％以上，極大地提高了華蓋木的繁殖數量與生長速率，為該物種的保護與繁育、引種馴化、保存和規模化生產供了技術支撐。

技術領域

本發明屬于植物組培技術領域，具體涉及一種華蓋木組培快繁方法。

背景技術

華蓋木(Manglietiastrum sinicum)隸屬于木蘭科華蓋木屬，常綠大喬木，高可達40米左右，胸徑1.2米，是中國云南特有種，起源于1.4億年前，是木蘭科中最古老的單屬種植物之一，因其樹干挺直光滑，樹冠巨大而得名。華蓋木是地質時代第三、四紀遺留下來的古老孑遺樹種，1999年被列為國家一級重點保護野生植物，被世界自然保護聯盟(IUCN)全球紅色名錄列為極度瀕危物種。是典型的極小種群野生植物。最早發現于云南省西疇縣法斗鄉，生于海拔1300～1500米的山溝常綠闊葉林中。由于分布范圍狹窄，且數量稀少而被稱為“植物中的大熊貓”。經過反復多次野外調查，目前僅存47株大樹，華蓋木結果量少，種子量不多，并存在結果大小年的情況，自然繁殖和更新都較為困難。

迄今為止，現有技術沒有關于華蓋木組培快繁和相關的生物技術方面的報道。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種華蓋木組培快繁方法，填補華蓋木生物技術上的空白，同時解決華蓋木在野外分布區域狹窄、種群數量稀少、種子苗量不足的問題。

本發明提供了一種華蓋木組培快繁的方法，包括以下步驟：

1)將消毒的華蓋木幼嫩的頂芽或側芽作為外植體接種至誘導與分化培養基中誘導分化培養，得到萌發的節芽；

所述誘導與分化培養基為包含0.5～3.0mg/L 6-BA、1.0mg/L IAA、30g/L蔗糖和5.0g/L瓊脂的MS培養基，pH值為5.8；

2)將所述萌發的節芽接種至增殖與繼代培養基中增殖繼代培養，得到增殖繼代材料；所述增殖與繼代培養基為包含0～2.0mg/L 6-BA、0.1～1.0mg/L IAA、30g/L蔗糖和5.0g/L瓊脂的MS培養基，pH值為5.8；3)將所述增殖繼代材料接種至壯苗與生根培養中培養，得到壯苗生根材料；所述壯苗與生根培養基為包含0.1～2.0mg/L IBA、0.1～2.0mg/LIAA、30g/L蔗糖和5.0g/L瓊脂的MS培養基，pH值為5.8；

4)將所述壯苗生根材料進行瓶苗移栽，得到華蓋木植株。

優選的，所述誘導與分化培養基為包含2.0mg/L 6-BA、1.0mg/L IAA、蔗糖30g/L和瓊脂5g/L的MS培養基，pH值為5.8。

優選的，所述增殖與繼代培養基為包含1.0mg/L 6-BA、0.5mg/L IAA、蔗糖30g/L和瓊脂5g/L的MS培養基，pH值為5.8。

優選的，所述壯苗與生根培養基為包含1.0mg/L IBA、1.0mg/L IAA、蔗糖30g/L和瓊脂5g/L的MS培養基，pH值為5.8。

優選的，所述誘導分化培養、增殖繼代培養或壯苗生根培養的條件如下：溫度為23～30℃；培養周期為30～60d；

在培養期間進行光照；光暗周期比為10:14；所述光照的強度為1300～1800Lux。

優選的，步驟1)中所述消毒前先用洗滌液浸泡，經流水沖洗干凈后進行外植體消毒；