[發明專利]一種用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙及制備方法

在審

• 申請號: 202011151402.3
• 申請日: 2020-10-25
• 公開（公告）號: CN112611863A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 熊攀;李強
• 申請（專利權）人: 武漢金鑒生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/532
• 代理公司: 武漢領君知識產權代理事務所(普通合伙) 42248
• 代理人: 汪俊鋒

1.一種用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙，其特征在于：包括PVC膠板以及依次搭接在所述PVC膠板上的吸樣墊、膠體碲結合墊、層析膜、吸水材料；

所述吸樣墊為含非離子型表面活性劑的玻璃纖維膜；

所述膠體碲結合墊為含膠體碲標記的雞IgY復合物和膠體碲標記的新型冠狀病毒S1抗體1復合物的玻璃纖維膜或聚脂膜；其中，新型冠狀病毒S1抗體1為北京義翹神州科技股份有限公司的貨號為40592-R001的兔單克隆抗體；

所述層析膜為硝酸纖維素膜，其上間隔設有檢測線、質控線，所述檢測線上噴涂有新型冠狀病毒S1抗體2，所述質控線上噴涂有羊抗雞IgY多克隆抗體，其中，新型冠狀病毒S1抗體2為北京義翹神州科技股份有限公司的貨號為40591-T62的兔多克隆抗體。

2.根據權利要求1所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙，其特征在于：所述非離子型表面活性劑是曲拉通-100。

3.根據權利要求1所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙，其特征在于：所述膠體碲結合墊中雞IgY與新型冠狀病毒S1抗體1的質量比為3:1。

4.根據權利要求1所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙，其特征在于：所述膠體碲以羥丙基甲基纖維素為模板，亞碲酸、維生素C為反應原料制成。

5.根據權利要求4所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙，其特征在于：羥丙基甲基纖維素、亞碲酸、維生素C的質量比為1-5:2:10-30。

6.權利要求1-5任一項所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

S1、吸樣墊的制備：將第一膜材料用第一處理液浸漬處理，烘干得到樣品墊；所述第一膜材料為玻璃纖維膜；所述第一次處理液包含如下按質量百分比計的組分：硼酸0.02-0.1%，硼砂0.05-0.25%，曲拉通-100 0.5-1.5%，酪蛋白0.1-1%，余量為水；

S2、膠體碲結合墊的制備：將膠體碲標記的雞IgY和膠體碲標記的新型冠狀病毒S1抗體1混合制備的第二處理液浸漬在第二膜材料上，干燥后得到膠體碲結合墊；所述第二膜材料可以是玻璃纖維膜或聚脂膜；

S3、層析膜的制備：將濃度新型冠狀病毒S1單克隆抗體2、羊抗雞IgY間隔的噴涂在第三膜材料上形成檢測線、質控線；所述第三膜材料為硝酸纖維素膜；

S4、組裝：將吸水材料以及制得的吸樣墊、膠體碲結合墊、層析膜按序粘貼在上的固定位置，分切得到用于唾液檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙。

7.根據權利要求6所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙的制備方法，其特征在于：步驟S2中，所述第二處理液的制備方法包括：

S21、膠體碲制備：取1g羥丙基甲基纖維素加入到100mL純化水中攪拌均勻得到模板；分別加入10g維生素C和2g亞碲酸，攪拌均勻；繼續反應30分鐘，得到膠體碲；

S22、雞IgY-膠體碲復合物的制備：取1mL步驟S21制備的膠體碲，加入5-50μL 0.1M碳酸鉀后混勻，調pH至8.0-10.0；再依次加入5-30μg的雞IgY、50-100μL 10%牛血清白蛋白，混勻；

S23、新型冠狀病毒S1抗體1-膠體碲復合物的制備：取1mL步驟S21制備的膠體碲加入10-50μL 0.1M碳酸鉀混勻，調整pH至8.0-10.0，再依次加入5-20μg的新型冠狀病毒S1抗體1、50-100μL 10%牛血清白蛋白，混勻；

S24、膠體碲復合物的純化：分別將步驟S22制備的雞IgY-膠體碲復合物和步驟S23制備的新型冠狀病毒S1抗體1-膠體碲復合物離心，棄除上清，再加入等體積的復溶液復溶；所述復溶液包含如下按質量百分比計的組分：0.06%硼酸、0.15%硼砂、0.5%酪蛋白、0.5% S-9、0.1%牛血清白蛋白、0.5%聚乙烯吡咯烷酮、20%蔗糖和5%海藻糖，余量為純化水；

S25、將復溶后的雞IgY-膠體碲復合物和新型冠狀病毒S1單克隆抗體1-膠體碲復合物按2:1體積比混合，得到第二處理液。

8.根據權利要求6所述的用于檢測2019新型冠狀病毒的膠體碲試紙的制備方法，其特征在于：步驟S1的烘干條件為：30～60℃下烘干10～24h；步驟S2的烘干條件為：30～55℃下烘干10～24h；步驟S3的烘干條件為：30～50℃下烘干4～12h。