[發(fā)明專利]一種采用本氏煙作為生物反應(yīng)器制備的輪狀病毒疫苗及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011139071.1 | 申請(qǐng)日： | 2020-10-22 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112251461B | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-08-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張莉莉;方榮祥;謝傳淼;宋直鈺;霍巖;張玉滿;瞿維歡;劉超仁 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 植鏈（上海）生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N15/84 | 分類號(hào)： | C12N15/84;C07K14/14;A61K39/15;A61P31/14;A61P1/12 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 何葉喧 |
| 地址： | 200335 上海*** | 國(guó)省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 采用 作為 生物反應(yīng)器 制備 輪狀病毒 疫苗 及其 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種制備P2-△VP8*蛋白的方法，包括如下步驟：
(1)將重組農(nóng)桿菌甲侵染本生煙植株，培養(yǎng)植株；
(2)取植株被侵染的組織，提取總蛋白；
(3)從總蛋白中純化得到P2-△VP8*蛋白；
重組農(nóng)桿菌甲是將表達(dá)P2-△VP8*基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌得到的；
P2-△VP8*基因編碼P2-△VP8*蛋白；
P2-△VP8*蛋白為SEQ ID NO:3所示的蛋白質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述P2-△VP8*基因?yàn)榫幋a區(qū)如SEQ ID NO:4所示的DNA分子。
3.一種制備P2-△VP8*重組蛋白的方法，包括如下步驟：
(1)將重組農(nóng)桿菌甲和重組農(nóng)桿菌乙共侵染本生煙植株，培養(yǎng)植株；
(2)取植株被侵染的組織，提取總蛋白；
(3)從總蛋白中純化得到P2-△VP8*重組蛋白；
重組農(nóng)桿菌甲是將表達(dá)P2-△VP8*基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌得到的；
P2-△VP8*基因編碼P2-△VP8*蛋白；P2-△VP8*蛋白為SEQ ID NO:3所示的蛋白質(zhì)；
重組農(nóng)桿菌乙是將表達(dá)P19基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌得到的；
P19基因編碼P19蛋白；P19蛋白如SEQ ID NO:7所示。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述P2-△VP8*基因?yàn)榫幋a區(qū)如SEQ ID NO:4所示的DNA分子。
5.一種制備P2-△VP8*蛋白的方法，包括如下步驟：
采用本生煙植株作為生物反應(yīng)器，植株葉片被注射重組農(nóng)桿菌甲，然后培養(yǎng)4-7天，然后取所述葉片提取總蛋白，然后從總蛋白中純化得到P2-△VP8*蛋白；
重組農(nóng)桿菌甲是將表達(dá)P2-△VP8*基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌得到的；
P2-△VP8*基因編碼P2-△VP8*蛋白；
P2-△VP8*蛋白為SEQ ID NO:3所示的蛋白質(zhì)。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述P2-△VP8*基因?yàn)榫幋a區(qū)如SEQ ID NO:4所示的DNA分子。
7.一種制備P2-△VP8*蛋白的方法，包括如下步驟：
采用本生煙植株作為生物反應(yīng)器，植株葉片被注射重組農(nóng)桿菌甲和重組農(nóng)桿菌乙，然后培養(yǎng)4-7天，然后取所述葉片提取總蛋白，然后從總蛋白中純化得到P2-△VP8*蛋白；
重組農(nóng)桿菌甲是將表達(dá)P2-△VP8*基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌得到的；
P2-△VP8*基因編碼P2-△VP8*蛋白；P2-△VP8*蛋白為SEQ ID NO:3所示的蛋白質(zhì)；
重組農(nóng)桿菌乙是將表達(dá)P19基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌得到的；
P19基因編碼P19蛋白；P19蛋白如SEQ ID NO:7所示。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述P2-△VP8*基因?yàn)榫幋a區(qū)如SEQ ID NO:4所示的DNA分子。
9.權(quán)利要求1至8中任一所述方法制備得到的P2-△VP8*蛋白或P2-△VP8*蛋白溶液。
10.P2-△VP8*蛋白，為SEQ ID NO:3所示的蛋白質(zhì)。
11.P2-△VP8*基因，為SEQ ID NO:4所示的DNA分子。
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