[發明專利]引物探針組合、檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202011137659.3
• 申請日: 2020-10-22
• 公開（公告）號: CN112266978A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 史蕾;胡孔新;張麗萍;劉麗娟
• 申請（專利權）人: 深圳國際旅行衛生保健中心(深圳海關口岸門診部);中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414
• 代理人: 郝文婷

1.一種引物探針組合，其特征在于，包括第一類引物探針組和第二類引物探針組，所述第一類引物探針組包括登革病毒特異性引物、第一類Y引物和第一類熒光探針，所述第一類Y引物包括第一類第一Y引物、第一類第二Y引物中的至少一種；所述第二類引物探針組包括寨卡病毒特異性引物、第二類Y引物和第二類熒光探針，所述第二類Y引物包括第二類第一Y引物、第二類第二Y引物中的至少一種；

其中，所述登革病毒特異性引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:1-2所示的核苷酸序列，或由所述SEQ ID NO:1-2所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一類第一Y引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:3所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一類第二Y引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:4所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一類熒光探針的核苷酸序列為SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:5所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述寨卡病毒特異性引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:6-7所示的核苷酸序列，或由所述SEQ ID NO:6-7所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第二類第一Y引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:8所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第二類第二Y引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:9所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第二類熒光探針的核苷酸序列為SEQ ID NO:10所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:10所示的核苷酸序列經缺失、插入或替換所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一類熒光探針上的熒光基團與所述第二類熒光探針上的熒光基團不同。

2.根據權利要求1所述的引物探針組合，其特征在于，所述第一類探針的5’端設有熒光基團FAM，3’端設有淬滅基團BHQ1。

3.根據權利要求1所述的引物探針組合，其特征在于，所述第二類探針的5’端設有熒光基團HEX，3’端設有淬滅基團BHQ2。

4.一種檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求1-3任一項所述的引物探針組合。

5.根據權利要求4所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述引物探針組合中，所述登革病毒特異性引物的終濃度為0.50μM-1.0μM，所述第一類Y引物的終濃度為0.50μM-1.0μM，所述第一類探針的終濃度為0.10μM-0.30μM；和/或

所述寨卡病毒特異性引物的終濃度為0.50μM-1.0μM，所述第二類Y引物的終濃度為0.50μM-1.0μM，所述第二類探針的終濃度為0.10μM-0.30μM。

6.根據權利要求4所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑盒還包括反應緩沖液、酶混合液、質控品中的至少一種。

7.根據權利要求6所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述反應緩沖液包括一步定量RT-qPCR緩沖液；和/或

所述質控品包括陽性質控品和陰性質控品。

8.權利要求4-7任一項所述檢測試劑盒在檢測登革病毒和/或寨卡病毒中的應用。