[發(fā)明專利]利用YPB肽段抑制乳腺癌細胞增殖及腫瘤生長的方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011128751.3
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112239753B
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 隋廣超;易誠;史金銘;李當(dāng)當(dāng)
• 申請（專利權(quán)）人: 東北林業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/70;A61K38/45;A61P35/00
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 岳泉清

利用YPB肽段抑制乳腺癌細胞增殖及腫瘤生長的方法和應(yīng)用，涉及利用YPB肽段抑制乳腺癌細胞增殖及腫瘤生長的方法和應(yīng)用。本發(fā)明的目的是為了提供能夠通過阻遏YY1和EZH2的結(jié)合進而抑制乳腺癌細胞增殖及腫瘤生長的物質(zhì)。本發(fā)明通過對蛋白分子間相互作用的研究，鑒定了YY1和EZH2兩個促癌蛋白之間的相互結(jié)合區(qū)域，并通過YY1在EZH2蛋白分子上結(jié)合區(qū)域的序列合成了含有YPB的FITC?TAT?GGG?YPB多肽，該多肽能夠通過干擾YY1和EZH2兩個分子的結(jié)合，阻遏它們的功能，進而抑制乳腺癌細胞的增殖以及裸鼠中移植瘤的生長。本發(fā)明可獲得利用YPB肽段抑制乳腺癌細胞增殖及腫瘤生長的方法和應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及利用YPB肽段抑制乳腺癌細胞增殖及腫瘤生長的方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

EZH2(Enhancer of zeste homolog 2)是一種組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶，催化組蛋白H3上的第27位賴氨酸(即H3K27)的三甲基化修飾，這一修飾是基因沉默的重要標(biāo)志[Kim andRoberts 2016,Nat Med]。EZH2是polycomb group(PcG)蛋白家族中的一員，其功能為通過調(diào)節(jié)染色質(zhì)重塑來抑制基因表達。EZH2還是polycomb repressive complex 2(PRC2，抑制復(fù)合體2)中重要的功能組成部分，負責(zé)維持基因表達的抑制。PcG蛋白參與表觀遺傳修飾。從功能上，PcG蛋白可以分為PRC1和PRC2兩個核心蛋白復(fù)合體，二者能夠抑制數(shù)百種基因，包括大量的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子。由于EZH2本身沒有DNA結(jié)合區(qū)域，因此需要被YY1等分子招募到靶基因上，以行使其在組蛋白H3K27位點上的甲基轉(zhuǎn)移酶功能[Pan et al.2013,EMBO J]。除了調(diào)節(jié)正常的生長發(fā)育之外，EZH2在很多形成實體瘤的癌細胞中過量表達，并與癌癥的不良臨床預(yù)后呈正相關(guān)性。因此，EZH2在實體瘤中被認為是一個原癌基因或促癌基因。在乳腺癌中，EZH2也存在高表達，并通過多個信號通道促進腫瘤細胞的增殖和癌轉(zhuǎn)移，因而被認為是一個癌癥治療中潛在的靶基因。目前，已經(jīng)有多種EZH2抑制劑被用于抑制腫瘤細胞的增殖，例如GSK343和EPZ005687[Kim and Roberts 2016,Nat Med]。

YY1最早是由Shi等人[Shi et al.1991,Cell]作為一個含有414個氨基酸的DNA結(jié)合蛋白而被發(fā)現(xiàn)的。作為一個轉(zhuǎn)錄因子，YY1具有“陰陽(Yin Yang)”的特性，即可以抑制或激活靶基因的表達。YY1是一個重要的表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)因子，其所調(diào)節(jié)的基因具有多種生物學(xué)功能，包括細胞生長，分化以及胚胎的發(fā)育。YY1可以結(jié)合多個參與表觀遺傳學(xué)的重要蛋白因子，包括調(diào)節(jié)組蛋白乙?；膒300/CBP、PCAF、HDACs，組蛋白甲基化的EZH2、EZH11、PRMT4，DNA甲基化的DNMTs(見綜述[Zhang et al.2011,Crit Rev Oncog])。

Yin Yang 1(YY1)是一個多功能蛋白，具有促進腫瘤細胞增殖的活性。如圖1所示，YY1蛋白分子上，有一個OPB(Onco-protein Binding)區(qū)域，可以結(jié)合多個促進癌癥發(fā)生及發(fā)展的蛋白(癌蛋白)，包括AKT,MDM2,E1A和EZH2[Zhang et al.2016,J Mol Cell Biol]。

在早期的研究中，人們對于YY1在癌癥發(fā)生中的作用一直不夠明確。直到2004年，我們發(fā)現(xiàn)了YY1可以負調(diào)節(jié)抑癌基因p53[Sui et al.2004,Cell]，其促癌或刺激細胞生長的功能才被意識到。值得注意的是，YY1的這一功能并不依賴于其調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的活性，這也就擴展了YY1的功能及調(diào)節(jié)范圍。與此同時，YY1對原癌基因EZH2功能的調(diào)節(jié)及促進作用也被發(fā)現(xiàn)。這些進一步加強了YY1的原癌基因地位，也增強了其作為癌癥治療中靶基因的可能性。有研究已經(jīng)證實EZH2在功能上依賴于YY1的OPB區(qū)域。YY1所調(diào)節(jié)的EZH2功能對腫瘤的形成和發(fā)展過程中的基因異常表達、抑制細胞凋亡和促進細胞增殖及生存等方面起到了重要的作用。因此，阻遏YY1與EZH2的相互作用將可能在多個信號通路上抑制腫瘤細胞的發(fā)展，以此分子原理為基礎(chǔ)的抑制劑將可能成為有效的抗癌藥物。

發(fā)明內(nèi)容