[發(fā)明專利]一種犬細(xì)小病毒疫苗株、疫苗及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011126639.6
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112195161B
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉艷霞;劉國英;舒秀偉;李鳳艷;王一平;侯芳芳
• 申請（專利權(quán)）人: 遼寧益康生物股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/23;A61P31/20;C12R1/93
• 代理公司: 北京五洲洋和知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11387
• 代理人: 榮紅穎;張洪生

1.一種用于治療、預(yù)防、減緩和/或控制犬細(xì)小病毒性腸炎的疫苗株，所述疫苗株是犬細(xì)小病毒疫苗株，所述犬細(xì)小病毒疫苗株是微生物保藏號為CGMCC No.19398的病毒株，或其臨床致病性與免疫原性沒有變化的傳代病毒株或突變病毒株。

2.一種用于治療、預(yù)防、減緩和/或控制犬細(xì)小病毒性腸炎的疫苗組合物，所述疫苗組合物以權(quán)利要求1所述的疫苗株為免疫原。

3.如權(quán)利要求2所述的疫苗組合物，其特征在于，所述疫苗組合物的原料包括所述免疫原和輔料。

4.如權(quán)利要求2所述的疫苗組合物，其特征在于，所述疫苗組合物為活疫苗組合物。

5.如權(quán)利要求3所述的疫苗組合物，其特征在于，所述疫苗組合物中，所述免疫原的用量和所述輔料的干重量用量比為1.0×10^5.0TCID₅₀：50-150mg。

6.如權(quán)利要求5所述的疫苗組合物，其特征在于，所述疫苗組合物中，所述免疫原的用量和所述輔料的干重量用量比為1.0×10^5.0TCID₅₀：105mg。

7.如權(quán)利要求5所述的疫苗組合物，其特征在于，所述免疫原的TCID₅₀是基于F81細(xì)胞培養(yǎng)根據(jù)Reed-Muench法計算得到的。

8.如權(quán)利要求3所述的疫苗組合物，其特征在于，所述輔料為凍干保護(hù)劑。

9.如權(quán)利要求8所述的疫苗組合物，其特征在于，所述凍干保護(hù)劑為包括2-3mg/mL聚乙烯吡咯烷酮、8-12mg/mL山梨醇、3-7mg/mL甘氨酸、30-50mg/mL蔗糖、30-60mg/mL海藻糖的水溶液。

10.權(quán)利要求3-9中任一項所述的疫苗組合物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：

將所述疫苗株制備成所述疫苗組合物。

11.如權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述疫苗株的培養(yǎng)方法包括如下步驟：

(i)將所述疫苗株接種到F81細(xì)胞中培養(yǎng)，收獲所述疫苗株的粗毒液；

(ii)將所述疫苗株的粗毒液純化，得到純化的疫苗株毒液。

12.如權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，當(dāng)CPE達(dá)到80％以上時，收獲所述疫苗株的粗毒液。

13.如權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，當(dāng)CPE達(dá)到90％以上時，收獲所述疫苗株的粗毒液。

14.如權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，按照所述病毒株與培養(yǎng)液10^5.0TCID₅₀：50-150ml的用量比接種。

15.如權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，按照MOI＝0.005～0.01的用量接種。

16.如權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，所述培養(yǎng)液為含2-8v/v％新生牛血清的RPMI Medium 1640。

17.如權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，所述培養(yǎng)的溫度為36.5-37.5℃。

18.如權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，在步驟(i)中，所述培養(yǎng)的pH值為7.0-7.5。