[發(fā)明專利]一種犬細小病毒疫苗株、疫苗及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011126639.6
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112195161B
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發(fā)明（設計）人: 劉艷霞;劉國英;舒秀偉;李鳳艷;王一平;侯芳芳
• 申請（專利權）人: 遼寧益康生物股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/23;A61P31/20;C12R1/93
• 代理公司: 北京五洲洋和知識產權代理事務所(普通合伙) 11387
• 代理人: 榮紅穎;張洪生

本發(fā)明公開了一種用于治療、預防、減緩或控制犬細小病毒性腸炎的犬細小病毒疫苗株，其微生物保藏號是CGMCC No.19398。該疫苗株毒力低，免疫原性良好。本發(fā)明還公開了以前述犬細小病毒疫苗株為免疫原的活疫苗組合物。該疫苗組合物安全有效。

技術領域

本發(fā)明屬于預防獸醫(yī)領域，涉及獸用活疫苗，尤其涉及一種犬細小病毒疫苗株、疫苗及其制備方法。

背景技術

隨著環(huán)境和人類生活飲食方式的改變，野生動物和伴侶動物與人類之間接觸日益密切，因此増加了人類感染動物源性疾病的潛在風險。犬是人類重要的伴侶動物之一，與人類朝夕相伴，因此，加強對犬主要疾病的防控是當務之急。

犬細小病毒(CPV)是引起犬的一種烈性傳染病的病原體，它所引起的急性出血性腸炎和非化膿性心肌炎，是對當今世界犬業(yè)威脅和危害最嚴重的急性、接觸性傳染病。該病已傳遍世界各類犬群，野生和家養(yǎng)犬群中均有CPV 廣泛蔓延。隨著我國工作犬(軍犬、警犬、導盲犬等)、實驗用犬和寵物犬飼養(yǎng)量的大幅增加，犬細小病毒感染日趨嚴重，給養(yǎng)業(yè)犬帶來了重大的經濟損失，成為危害養(yǎng)犬業(yè)重大疫病之一。故徹底消除該病已成為一大難題，因此，防治犬細小病毒性腸炎已成為長期而艱巨的任務，研制安全有效的疫苗就顯得十分重要。

發(fā)明內容

本發(fā)明制備的犬細小病毒活疫苗，采用國內流行毒株的F81細胞傳代致弱株，毒力和免疫原性良好，病毒含量高，免疫持續(xù)時間長，疫苗安全有效。

為了解決現(xiàn)有技術中存在的問題，本發(fā)明第一方面提供了一種用于治療、預防、減緩和/或控制犬細小病毒性腸炎的疫苗株，所述疫苗株是犬細小病毒疫苗株，所述犬細小病毒疫苗株是微生物保藏號為CGMCC No.19398的病毒株，或其臨床致病性與免疫原性沒有變化的傳代病毒株或突變病毒株。

本發(fā)明第二方面提供了一種用于治療、預防、減緩和/或控制犬細小病毒性腸炎的疫苗組合物，所述疫苗組合物以本發(fā)明第一方面所述的疫苗株為免疫原。

在一些實施方式中，所述疫苗組合物的原料包括所述免疫原和輔料。

在一些實施方式中，所述疫苗組合物為活疫苗組合物。

在一些實施方式中，所述疫苗組合物中，所述免疫原的用量和所述輔料的干重量用量比為1.0×10^5.0TCID₅₀：50-150mg(比如，1.0×10^5.0TCID₅₀：60mg、 70mg、80mg、90mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg)。

在一些實施方式中，所述疫苗組合物中，所述免疫原的用量和所述輔料的干重量用量比為1.0×10^5.0TCID₅₀：105mg。

在一些實施方式中，所述免疫原的TCID₅₀是基于F81細胞培養(yǎng)根據(jù) Reed-Muench法計算得到的。

在一些實施方式中，所述疫苗株的培養(yǎng)方法包括如下步驟：

(i)將所述疫苗株接種到F81細胞中培養(yǎng)，收獲所述疫苗株的粗毒液；

(ii)將所述疫苗株的粗毒液純化，得到純化的疫苗株毒液。

在一些實施方式中，在步驟(i)中，當CPE達到80％(比如，85％、 88％、92％、95％、98％)以上時，收獲所述疫苗株的粗毒液。

在一些實施方式中，在步驟(i)中，當CPE達到90％以上時，收獲所述疫苗株的粗毒液。