[發(fā)明專利]一種海棲熱袍菌纖維寡糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、其編碼基因及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011123907.9
• 申請(qǐng)日: 2020-10-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112239489B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 湯宏赤;閉德武;郭媛;龐浩;劉藝;林麗華;周冰清
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西科學(xué)院
• 主分類號(hào): C07K14/195
• 分類號(hào): C07K14/195;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12N15/31;C12N15/70;C12P19/14;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00
• 代理公司: 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張換君

1.一種海棲熱袍菌纖維寡糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在纖維寡糖發(fā)酵中的應(yīng)用，其特征在于，所述海棲熱袍菌纖維寡糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的氨基酸序列如 SEQ ID NO.1 所示，所述的纖維寡糖包括纖維二糖、纖維三糖、纖維四糖、纖維五糖中的一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述海棲熱袍菌纖維寡糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的編碼基因的 DNA 序列如 SEQ ID NO.2 所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述海棲熱袍菌纖維寡糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的制備方法具體包括如下步驟：

（1）pET-Tma-cbtA 重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建；

（2）重組底物結(jié)合蛋白的表達(dá)：將步驟(1)所述重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌中，培養(yǎng)基因工程菌、誘導(dǎo)重組底物結(jié)合蛋白表達(dá)；

（3）純化步驟（2）所得的重組底物結(jié)合蛋白；

（4）將步驟（3）所得純化重組底物結(jié)合蛋白的洗脫液透析除鹽，得到純的重組底物結(jié)合蛋白。

4.根據(jù)權(quán)利要求 3 所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟（2）所述基因工程菌在含卡那霉素以及氯霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，采用的誘導(dǎo)劑為 IPTG。

5.根據(jù)權(quán)利要求 3 所述的應(yīng)用，其特征在于，所述基因工程菌的轉(zhuǎn)化方法為氯化鈣-氯化鎂法。

6.根據(jù)權(quán)利要求 3 所述的應(yīng)用，其特征在于，所述純化重組底物結(jié)合蛋白的方法為親和層析法。

7.根據(jù)權(quán)利要求 1 所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的纖維寡糖為纖維五糖。