[發(fā)明專利]一種提高蛋白核小球藻發(fā)酵油脂的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011121571.2
• 申請日: 2020-10-20
• 公開（公告）號: CN112266938A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李悅明;徐建春;徐炳政;韓萍;董婉
• 申請（專利權(quán)）人: 青島科海生物有限公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 青島智地領(lǐng)創(chuàng)專利代理有限公司 37252
• 代理人: 張紅鳳

本發(fā)明公開了一種提高蛋白核小球藻發(fā)酵油脂的方法，屬于微藻的開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括：活化培養(yǎng)步驟，將蛋白核小球藻接種于培養(yǎng)基中活化培養(yǎng)至對數(shù)生長期并作為種子液；然后將蛋白核小球藻接種到培養(yǎng)基的搖瓶中，置于光照搖床中培養(yǎng)；最后將培養(yǎng)結(jié)束后的微生物細(xì)胞經(jīng)離心、洗滌和冷凍干燥后，即得到粉末，用于測定評價蛋白核小球藻生物質(zhì)油脂濃度、總脂含量和脂肪含量及其產(chǎn)率。本發(fā)明利用不同培養(yǎng)基組成，包括碳源、氮源、碳氮比、二價金屬離子及不同培養(yǎng)條件如溫度、培養(yǎng)初始pH值等對小球藻細(xì)胞生長和脂肪積累的影響，測定和分析了該微生物油脂的脂肪酸組成，經(jīng)氣相色譜分析結(jié)果表明，不飽和脂肪酸含量達(dá)到73％左右。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微藻的開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用蛋白核小球藻發(fā)酵油脂的方法。

背景技術(shù)

微藻是一類單細(xì)胞藻類，其具有細(xì)胞增殖快、生產(chǎn)周期短、不受季節(jié)和土地的限制、所需的培養(yǎng)基來源豐富，以及所產(chǎn)的油脂成分與植物油類似等優(yōu)點(diǎn)，因此，利用微藻開發(fā)油脂資源已日益受到人們的青睞。微藻被認(rèn)為是一種極具潛力的生物柴油原料。

蛋白核小球藻為綠藻門小球藻，屬普生性單細(xì)胞綠藻，小球藻繁殖能力極強(qiáng)，能利用太陽光制造大量的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)含量50％左右，超過諸如牛肉、大豆等高蛋白食物；還含有不飽和脂肪酸10％～30％、碳水化合物10％～25％，并含有8種必需氨基酸、豐富的多種維生素，及鐵、鋅、鈣、鉀等礦物質(zhì)。另外，人們還發(fā)現(xiàn)小球藻內(nèi)含有一種珍貴的生長因子(CGF)，它能促進(jìn)機(jī)體，特別是兒童及老年人體質(zhì)的增強(qiáng)，并能使免疫功能得到強(qiáng)化。

現(xiàn)有技術(shù)中有研究利用蛋白核小球藻作為吸附重金屬的生物吸附劑，如申請?zhí)?01910856249.5公開了一種吸附重金屬的生物吸附劑的制備方法，第一錐形瓶中加入定容完成的培養(yǎng)基，然后滴加鹽酸；培養(yǎng)基置于滅菌設(shè)備進(jìn)行高溫滅菌，并對滅菌完成后的培養(yǎng)基進(jìn)行冷卻處理；加入儲備液至冷卻后的培養(yǎng)基中；接入蛋白核小球藻種子液后將第二錐形瓶置于光照培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；每天定時搖動第二錐形瓶3次，培養(yǎng)3天后將第一代藻液以體積比為1:1的接種量轉(zhuǎn)接出來為第二代藻液，重復(fù)轉(zhuǎn)接3代后活化成功，并將活化后的蛋白核小球藻藻液稀釋轉(zhuǎn)接藻種，擴(kuò)大培養(yǎng)后成為重金屬生物吸附劑，達(dá)到該吸附劑可以對水中多種重金屬同時去除。

上述現(xiàn)有技術(shù)中利用蛋白核小球藻來吸附重金屬，但是現(xiàn)有技術(shù)鮮有報道蛋白核小球藻在生物原料油制備方面的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種提高蛋白核小球藻發(fā)酵油脂的方法，該方法利用蛋白核小球藻產(chǎn)油，大大提高了蛋白核小球藻油脂產(chǎn)量，且該方法簡便易行，能降低能耗和生產(chǎn)成本，在利用產(chǎn)油微生物進(jìn)行生物原料油制備方面，具有重要的應(yīng)用價值。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：

一種提高蛋白核小球藻發(fā)酵油脂的方法，依次包括以下步驟：

S1、活化培養(yǎng)：

將蛋白核小球藻接種于第一培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng)，培養(yǎng)至對數(shù)生長期并作為種子液；

所述的第一培養(yǎng)基中組分及含量分別為：葡萄糖10g/L，KNO₃ 0.08g/L，K₂HPO₄·3H₂O 1.0g/L，MgSO₄·7H₂O 0.3g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.003g/L，維生素B1 5-10g/L，A5微量元素溶液1mL/L；

S2、光照搖床中培養(yǎng)：

將經(jīng)過活化培養(yǎng)后的蛋白核小球藻接種到裝有第二培養(yǎng)基的搖瓶中，置于光照搖床中進(jìn)行培養(yǎng)；

S3、步驟S2光照搖床中培養(yǎng)結(jié)束所得微生物細(xì)胞依次經(jīng)離心、洗滌和冷凍干燥后，即得。