[發(fā)明專利]一種滇北球花報(bào)春人工高效繁殖的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011118635.3
• 申請(qǐng)日: 2020-10-19
• 公開（公告）號(hào): CN112293251A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃衡宇;曾彪;陳建穎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 昆明金科智誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 53216
• 代理人: 楊釗霞

本發(fā)明公開了一種滇北球花報(bào)春人工高效繁殖的方法，包括將消毒滅菌處理后的滇北球花報(bào)春葉片外植體接種于培養(yǎng)基A中培養(yǎng)，在光照度1800?2300lx，光照時(shí)間8h/d，溫度控制在20±1℃的條件下進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和叢芽發(fā)生培養(yǎng)；30d后將誘導(dǎo)出的叢生芽轉(zhuǎn)接于新鮮的A培養(yǎng)基中培養(yǎng)，30d后不定芽增殖系數(shù)達(dá)20.00左右。待增殖叢生芽高5?8cm時(shí)，單苗接入培養(yǎng)基B中培養(yǎng)25?30d后獲得苗壯根粗的生根苗，然后將該生根苗移栽。本發(fā)明成本低、周期短、試管苗質(zhì)量和成活率高，為保護(hù)野生資源、優(yōu)質(zhì)種苗繁育提供了技術(shù)支撐，可在短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)基因型背景一致的優(yōu)良種苗。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中草藥繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種滇北球花報(bào)春人工高效繁殖的方法。

背景技術(shù)

滇北球花報(bào)春(Primula denticulata)為報(bào)春花科(Primulaceae)報(bào)春花屬(Primula)多年生草本，滇北球花報(bào)春花葶通常較粗壯，長(zhǎng)達(dá)葉叢的6倍以上，花冠亦稍大，分布區(qū)與原亞種不連接。花期3-4月，果期4月。產(chǎn)于云南，四川西部等地。生于山坡草地和灌叢中，海拔1500-3000米。

滇北球花報(bào)春為野洋參的基原植物，又名米傘花(貴州民間藥物)、報(bào)春花(云南中草藥)，以其根入藥，具有補(bǔ)虛，消疳，通乳的功效。主治虛勞咳嗽，病后體虛，小兒疳積，乳汁不下等癥；在《生草藥性備要》、《貴州草藥》、《全國(guó)中草藥匯編》中均指出其具有行氣血、消腫毒、止痛功效，主治胃痛、腹痛、痛風(fēng)、骨折、跌打損傷、癰癤腫痛、皮膚潰瘍等癥。

近年來，隨著人們對(duì)它的需求，加上野外生境的破壞，滇北球花報(bào)春資源銳減，嚴(yán)重限制了對(duì)其研究開發(fā)工作的進(jìn)行。滇北球花報(bào)春通常以其種子為繁殖單位。但種子萌發(fā)率低，實(shí)生苗生長(zhǎng)緩慢且生物量較小、后代變異大，并受到萌發(fā)季節(jié)的限制，難以進(jìn)行規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化(基因型背景一致)種植和高藥效品種的大面積推廣。因此，需要尋求一種新的成本低、時(shí)間短、質(zhì)量和成活率高，且能將優(yōu)良性狀固定下來的高效人工繁殖方法來擴(kuò)大滇北球花報(bào)春種苗的繁殖量，進(jìn)行其高品質(zhì)種苗的工廠化生產(chǎn)，以滿足種植需求。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)以上問題，本發(fā)明提供了一種滇北球花報(bào)春人工高效繁殖的方法，以解決滇北球花報(bào)春通常以其種子為繁殖單位，存在萌發(fā)率低，實(shí)生苗生長(zhǎng)緩慢且生物量較小、后代變異大，并受到萌發(fā)季節(jié)的限制，難以進(jìn)行規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化種植，高藥效品種難以大面積推廣的問題。

根據(jù)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種滇北球花報(bào)春人工高效繁殖的方法，包括將消毒滅菌處理后的葉片外植體經(jīng)愈傷組織誘導(dǎo)、叢生芽發(fā)生同步誘導(dǎo)、叢生芽增殖、不定根誘導(dǎo)和馴化移栽過程，具體包括如下步驟：

步驟1：外植體的獲取

選擇生長(zhǎng)勢(shì)好、無病蟲害、無畸形的健壯植株，取其當(dāng)年生葉片；

步驟2：消毒處理

將步驟1獲取的葉片進(jìn)行消毒處理；

步驟3：愈傷組織誘導(dǎo)和叢生芽發(fā)生培養(yǎng)

將經(jīng)過步驟2消毒滅菌好的葉片接入培養(yǎng)基A中，控制光照度、溫度、光照時(shí)間的條件下進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和叢生芽發(fā)生；

步驟4：叢生芽增殖培養(yǎng)

將步驟3中培養(yǎng)的叢生芽轉(zhuǎn)入新鮮的培養(yǎng)基A中，控制光照度、溫度、光照時(shí)間的條件下進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)；

步驟5：

取步驟4叢芽中的健壯主苗接種于下列培養(yǎng)基B中，控制光照度、溫度、光照時(shí)間的條件下獲得苗壯根粗的生根苗；

步驟6：煉苗和移栽。

進(jìn)一步地，步驟1中所述葉片進(jìn)行消毒處理的方法為：