[發(fā)明專利]一種熒光檢測分子印跡聚合物及其用途和檢測試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011108219.5
• 申請日: 2020-10-16
• 公開（公告）號: CN113174045A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王偉麗;王兆安;郭文勝
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州美迪生物醫(yī)藥技術(shù)開發(fā)有限公司
• 主分類號: C08G77/26
• 分類號: C08G77/26;C08J9/26;C08K9/10;C08K3/30;G01N21/64;G01N33/574;G01N33/58
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本申請涉及分子印跡熒光檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于下轉(zhuǎn)換核殼納米晶材料的熒光檢測分子印跡聚合物及其在甲胎蛋白檢測中的用途和檢測試劑盒。一種基于下轉(zhuǎn)換核殼納米晶材料的分子印跡聚合物，該分子印跡聚合物的分子式如下：CaS:Na/Ce/Eu@SrS:Ce/Mn@MIP，以CaS:Na/Ce/Eu@SrS:Ce/Mn納米晶為載體，3?氨基丙基三乙氧基硅烷為功能單體，四乙氧基硅烷為交聯(lián)劑，甲胎蛋白為模板分子制備而成。與血液中的甲胎蛋白能夠發(fā)生特異性結(jié)合，導(dǎo)致納米晶熒光猝滅，且熒光強(qiáng)度變化與甲胎蛋白的濃度密切相關(guān)，通過擬合納米晶熒光強(qiáng)度和甲胎蛋白濃度的關(guān)系曲線，能夠很好的應(yīng)用于甲胎蛋白的定量檢測，具有生物相容性好、選擇性高、快響應(yīng)、非接觸式與高準(zhǔn)確度的優(yōu)勢。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及分子印跡熒光檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于下轉(zhuǎn)換核殼納米晶材料的熒光檢測分子印跡聚合物及其在甲胎蛋白檢測中的用途和檢測試劑盒。

背景技術(shù)

甲胎蛋白(AFP)在臨床上對于肝癌檢測和追蹤來說，是一種非常可靠有效的腫瘤標(biāo)志物。尤其，對甲胎蛋白的分析也給我們能及時檢測到病情的發(fā)展?fàn)顩r以及病人對于治療的結(jié)果，提供了一個很好的機(jī)會。通常情況下，健康人體內(nèi)甲胎蛋白的含量低于25ng/mL，如果成人體內(nèi)血清中甲胎蛋白的含量升高，即可視為不正常。所以科學(xué)研究者不斷地研究新方法并將其應(yīng)用在對甲胎蛋白的檢測上。

熒光檢測方法由于其響應(yīng)速度快，靈敏度高，已成功用于蛋白質(zhì)分析。然而，熒光生物傳感系統(tǒng)常常受到可能影響熒光強(qiáng)度的共存物質(zhì)的干擾。分子印跡聚合物是一種通過以特定的目標(biāo)分子為模板，制備具有與模板分子互補(bǔ)的預(yù)定結(jié)合位點的人造受體，具有高選擇性。分子印跡聚合物還具有穩(wěn)定性高，親和力強(qiáng)，易于制備等顯著的優(yōu)點。目前，分子印跡聚合物已被應(yīng)用于抗體模擬物，固相萃取，化學(xué)/生物傳感和藥物輸送等方面。

近年來，熒光型分子印跡聚合物因其靈敏度高，選擇性高，取樣少，操作簡便等特點，成為蛋白質(zhì)檢測領(lǐng)域的研究熱點。常用于制備熒光型分子印跡聚合物的熒光材料有有機(jī)染料和量子點。但有機(jī)染料光穩(wěn)定性較差并具有潛在的毒性。量子點由于其良好的光學(xué)性能和較高的化學(xué)穩(wěn)定性，已經(jīng)成為制備熒光分子印跡聚合物最廣泛使用的熒光材料之一。盡管基于量子點的分子印跡聚合物具有高光學(xué)效率和低檢測限，但量子點仍然存在固有的潛在毒性和環(huán)境危害性。因此，開發(fā)生態(tài)友好的新型熒光型分子印跡是目前發(fā)展趨勢之一。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述的技術(shù)問題，本申請的目的是提供一種基于下轉(zhuǎn)換核殼納米晶材料的分子印跡聚合物，與血液中的甲胎蛋白能夠發(fā)生特異性結(jié)合，導(dǎo)致納米晶熒光猝滅，且熒光強(qiáng)度變化與甲胎蛋白的濃度密切相關(guān)，通過擬合納米晶熒光強(qiáng)度和甲胎蛋白濃度的關(guān)系曲線，能夠很好的應(yīng)用于甲胎蛋白的定量檢測，具有生物相容性好、選擇性高、快響應(yīng)、非接觸式與高準(zhǔn)確度的優(yōu)勢。

為了實現(xiàn)上述的目的，本申請采用了以下的技術(shù)方案：

一種基于下轉(zhuǎn)換核殼納米晶材料的分子印跡聚合物，該分子印跡聚合物的分子式如下：CaS:Na/Ce/Eu@SrS:Ce/Mn@MIP，以CaS:Na/Ce/Eu@SrS:Ce/Mn納米晶為載體，3-氨基丙基三乙氧基硅烷為功能單體，四乙氧基硅烷為交聯(lián)劑，甲胎蛋白為模板分子制備而成。

優(yōu)選，所述納米晶材料為水溶性納米晶材料，由檸檬酸配體包覆CaS:Na/Ce/Eu@SrS:Ce/Mn納米晶構(gòu)成。

優(yōu)選，所述CaS:Na/Ce/Eu@SrS:Ce/Mn納米晶為CaS:10Na/20Ce/5Eu@SrS:20Ce/6Mn。

優(yōu)選，所述納米晶的制備方法步驟如下：

1)0.65毫摩爾乙酸鈣，0.1毫摩爾乙酸鈉，0.2毫摩爾乙酸鈰，0.05毫摩爾乙酸銪，10毫升油酸和25毫升十八烯加入到三口燒瓶中，在氮氣保護(hù)氣氛條件下，于120℃攪拌并保溫40分鐘，然后迅速升溫至230℃，并保溫1小時；