[發明專利]甲氧基去甲腎上腺素衍生物、免疫原、特異性抗體及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202011107928.1
• 申請日: 2020-10-16
• 公開（公告）號: CN112225672B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 張小可;胡振陽;靳麗萍;王惠敏
• 申請（專利權）人: 長沙博源醫療科技有限公司
• 主分類號: C07C233/18
• 分類號: C07C233/18;C07C231/12;C07K14/765;C07K1/107;C07K16/18;C07K16/06;G01N33/74;G01N33/58;G01N33/543
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本發明公開了一種甲氧基去甲腎上腺素衍生物、免疫原、抗甲氧基去甲腎上腺素特異性抗體及其制備方法與應用。首先將新型甲氧基去甲腎上腺素衍生物與經過基因工程改造得到的重組牛血清白蛋白偶聯制得甲氧基去甲腎上腺素人工抗原，再用甲氧基去甲腎上腺素人工抗原免疫實驗動物獲得抗甲氧基去甲腎上腺素特異性抗體，經ELISA檢測表明該特異性抗體的特異性強、靈敏度高，干擾實驗顯示該特異性抗體與常見的32種激素無任何交叉反應；將抗甲氧基去甲腎上腺素特異性抗體應用于制備甲氧基去甲腎上腺素檢測試劑，包括甲氧基去甲腎上腺素均相酶免疫檢測試劑與甲氧基去甲腎上腺素膠乳增強免疫比濁檢測試劑，所述檢測試劑可以實現在全自動生化分析儀上對甲氧基去甲腎上腺素的高通量、快速化檢測。

技術領域

本發明涉及一種甲氧基去甲腎上腺素衍生物、免疫原、抗甲氧基去甲腎上腺素特異性抗體及其制備方法與應用，屬于生物醫學檢測技術領域。

背景技術

甲氧基去甲腎上腺素（Normetanephrine，NMN）即3-甲氧基去甲腎上腺素，主要為去甲腎上腺素的中間代謝產物。兒茶酚胺（catecholamine， CA）為腎上腺髓質、腎上腺神經元及腎上腺外嗜鉻體分泌的激素，主要包括腎上腺素（epinephrine，E）和去甲腎上腺素(Norepinephrine，NE)等。腎上腺素主要通過腎上腺髓質和嗜鉻細胞在兒茶酚-O-甲基轉移酶（catechol-Omethyl transferase ，COMT）作用下轉化為甲氧基腎上腺素（Metanephrine，MN），去甲腎上腺素主要通過神經元以外的組織和嗜鉻細胞在COMT作用下轉化為甲氧基去甲腎上腺素。尿液中甲氧基去甲腎上腺素的測定可間接反映體內兒茶酚胺的分泌，常與尿甲氧基腎上腺素聯合檢測，對腎上腺疾病的診斷有著重要的臨床意義。尿MN和NMN的檢測僅與臨床用藥和特定飲食有關，而血MN和NMN檢測易受噪音、咖啡因、吸煙和某些食物等因素的影響，因此尿MN和NMN檢測更準確。有文獻指出，24h尿MN、NMN診斷腎上腺髓質功能亢進，被認為是目前最為可靠的檢查。尿NMN的檢測具有重要的臨床意義：（1）可用于繼發性高血壓的診斷。（2）可以作為評價2型糖尿病患者血糖控制情況的指標。（3）可用于腎上腺髓質增生癥的定性診斷。（4）可用于甲狀腺功能亢進癥、甲狀腺功能減退癥、急慢性肝炎、肝硬化、慢性腎功能不全等疾病的診斷。

檢測方法較多，主要包括：比色法、放射免疫分析法（RIA）、高效液相色譜法（HPLC）、液相串聯質譜法(LC-MS/MS)、酶聯免疫吸附測定法(ELISA)、免疫比濁法等。比色法檢測的是兒茶酚胺類和甲氧基去甲腎上腺素類物質的總和而非單一化合物水平；放射免疫分析法（RIA）穩定性較差，且存在放射線輻射和污染等問題；高效液相色譜法（HPLC）前處理復雜，要求目標分析物在色譜上被完全分離，因此分析時間較長；液相串聯質譜法(LC-MS/MS)檢測靈敏度高，快速，但結構復雜，維護成本高，需經過專門培訓的技術人員操作，不易在基層醫療機構普及。酶聯免疫吸附測定法(ELISA)靈敏度高，特異性好，但檢測時間長，準確度差，難以用于批量檢測。

因此，目前市面上缺乏線性范圍寬、靈敏度高、準確度高、精密度高，檢測時間短，樣品處理簡單，儀器自動化程度高，可多樣本連續檢測的甲氧基去甲腎上腺素檢測產品。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的第一個目的在于提供一種甲氧基去甲腎上腺素衍生物，該衍生物為新合成的化合物，自然界中不存在。

本發明的第一個目的采用以下技術方案實現：一種甲氧基去甲腎上腺素衍生物，其結構式如式Ⅰ所示：

式Ⅰ。

本發明的第二個目的在于提供一種如上所述的甲氧基去甲腎上腺素衍生物的合成方法，該合成方法不同于常規合成方法，具有良好的合成效果，顯著提高了甲氧基去甲腎上腺素衍生物的合成效率。

本發明的第二個目的采用以下技術方案實現：一種如上所述的甲氧基去甲腎上腺素衍生物的合成方法，如下式所示：

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反應過程包括以下步驟：