[發明專利]牛擴展多能性胚胎干細胞的建系方法及培養液

在審

• 申請號: 202011105397.2
• 申請日: 2020-10-15
• 公開（公告）號: CN114369567A
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 李喜和;趙麗霞;王子馨;包斯琴;劉澎濤;曹貴芳
• 申請（專利權）人: 內蒙古大學;內蒙古賽科星家畜種業與繁育生物技術研究院有限公司
• 主分類號: C12N5/0735
• 分類號: C12N5/0735
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了牛擴展多能性胚胎干細胞(bEPSC)的建系方法及培養液，該胚胎干細胞產品從牛胚胎中分離、誘導得到，并能夠穩定傳代培養。該胚胎干細胞具有全能性、穩定性和安全性，可用于牛(乳用品種、肉用品種、兼用品種或役用品種等)育種繁育、基因編輯、動物克隆、醫學模型、藥物開發載體和誘導生產牛生殖配子等多種生命科學以及醫學領域的應用，并可以進行大規模生產應用。

技術領域

本發明屬于細胞生物學和分子生物學技術領域，具體涉及一種牛擴展多能性胚胎干細胞的建系方法及培養液。

背景技術

胚胎干細胞(ESCs)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細胞，它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境，胚胎干細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型，現存的干細胞系對發育、疾病和治療研究已經非常有用。然而，兩種當前可用的干細胞系---胚胎干細胞(ESC)和誘導性多能干細胞(ipsC)具有某些限制，它們還不可能分化為每種細胞類型，因此在產生某些細胞類型時，它們被排除在外。

2017年，中國、美國、英國、日本和澳大利亞的研究人員首次在小鼠中構建出潛能擴展性干細胞(Expanded Potential Stem Cells，EPSC)，它們比當前的干細胞系具有更大的發育潛力。這些干細胞具有發育中的胚胎內的最初細胞的特征，而且能夠發育成任何一種細胞類型。這些研究人員發現他們新培養的細胞保持著這些最初的細胞的發育特征，因而將它們稱為EPSC。重要的是，他們也能夠在一種新的條件下將小鼠ESC和ipsC重編程為EPSC，從而讓它們的發育時鐘返回到這些最初的細胞類型。當受精卵發育為胚泡(blastocyst，也譯作囊胚)時，它產生將形成胚胎(ESC就來自胚胎)的細胞和兩種其他的將產生胎盤或卵黃囊的細胞類型。利用胚泡中的這三種細胞類型就可能建立三種不同類型的干細胞，包括ESC。EPSC是首個能夠產生所有這三種胚泡干細胞類型的干細胞，這就使得它們具有更大的發育潛力。

目前研究多以小鼠為研究對象，已經成功建立了小鼠(Establishment inculture of pluripotential cells from mouse embryos[J].Nature，1981，292(5819):154-156.)、大鼠(Germline Competent Embryonic Stem Cells Derived from RatBlastocysts[J].Cell，2008，135(7):1299-1310.)、獼猴(Proceedings of the NationalAcademy of Sciences of the United States of America，1995，92(17):7844-7848.)豬(Establishment of porcine and human expanded potential stem cells[J].NatureCell Biology，2019，21(6):687-699.)和人(Embryonic Stem Cell Lines Derived fromHuman Blastocysts[J].Science，1998，282(5391):1145-1147.)的胚胎干細胞細胞系。