[發明專利]白細胞介素-6的檢測試劑、試紙、試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202011100731.5
• 申請日: 2020-10-15
• 公開（公告）號: CN112269024A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 徐蕊萍;婁珺;周偉
• 申請（專利權）人: 上海捷門生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/533
• 代理公司: 上海上谷知識產權代理有限公司 31342
• 代理人: 蔡繼清

1.一種白細胞介素-6的檢測試劑，其特征在于，所述白細胞介素-6的檢測試劑包含標記有白細胞介素-6抗體的羧基修飾時間分辨熒光微球；且所述羧基修飾時間分辨熒光微球通過鏈霉親和素和生物素被白細胞介素-6抗體標記。

2.根據權利要求1所述的白細胞介素-6的檢測試劑，其特征在于，所述羧基修飾時間分辨熒光微球上連接有含有碳原子的氨基酸。

3.根據權利要求2所述的白細胞介素-6的檢測試劑，其特征在于，所述含有碳原子的氨基酸為氨基正己酸。

4.根據權利要求2所述的白細胞介素-6的檢測試劑，其特征在于，所述羧基修飾時間分辨熒光微球與所述含有碳原子的氨基酸的質量比為1：16～1：15；

所述羧基修飾時間分辨熒光微球與鏈霉親和素的質量比為10：1～12：1；

所述羧基修飾時間分辨熒光微球與白細胞介素-6抗體的質量比為1：1～1：1.5；

所述白細胞介素-6與生物素的質量比為10：1～12：1。

5.一種制備白細胞介素-6的檢測試劑的方法，其特征在于，所述方法用于制備權利要求1至4中任一項所述的白細胞介素-6的檢測試劑，所述方法包括步驟：

步驟一、在活性劑存在下，將羧基修飾時間分辨熒光微球與鏈霉親和素進行偶聯反應，從而得到活化的鏈霉親和素標記的羧基修飾時間分辨熒光微球；

步驟二、將生物素標記的白細胞介素-6抗體與前述步驟一得到的活化的鏈霉親和素標記的羧基修飾時間分辨熒光微球進行偶聯反應，從而得到標記有白細胞介素-6抗體的羧基修飾時間分辨熒光微球；

步驟三、封閉劑處理前述步驟二得到的標記有白細胞介素-6抗體的羧基修飾時間分辨熒光微球，從而得到所述白細胞介素-6的檢測試劑。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法步驟一前還包括步驟：

步驟四、在活性劑存在下，將羧基修飾時間分辨熒光微球與含有碳原子的氨基酸進行偶聯反應，從而得到連接有含有碳原子的氨基酸的羧基修飾時間分辨熒光微球。

7.根據權利要求5或6中任一項所述的方法，其特征在于，所述活性劑為含有-N＝C＝N-結構片段的有機化合物和/或NHS。

8.一種白細胞介素-6的檢測試紙，其特征在于，所述檢測試紙包括：

底板、固定于所述底板的樣品墊、標記墊、層析膜和吸水墊；

所述樣品墊、標記墊、層析膜和吸水墊依次排列在底板上且順次接觸；

所述標記墊上噴有第一檢測試劑和第一質控試劑；所述第一檢測試劑為權利要求1至4任一項所述的檢測試劑；所述第一質控試劑包括標記有兔抗雞IgY抗體；

所述層析膜遠離標記墊的一端設置有質控線，所述質控線上固定包被有第二質控試劑，所述第二質控試劑包含兔抗雞IgY抗體；

所述層析膜靠近標記墊的一端設置有檢測線，所述檢測線上固定包被有第二檢測試劑；所述第二檢測試劑包括白細胞介素-6抗體。

9.一種白細胞介素-6的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權利要求8所述的檢測試紙。

10.一種白細胞介素-6的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括步驟：

步驟a、取待檢測樣本與樣本稀釋液混合；

步驟b、將步驟a得到的混合液加至權利要求8所述的檢測試紙的樣品墊上進行免疫層析反應；

步驟c、檢測所述檢測試紙上檢測線處的熒光值，根據標準曲線得到待檢測樣本中白細胞介素-6的含量。