[發明專利]一種呼吸道感染病原體核酸聯合檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011098442.6
• 申請日: 2020-10-14
• 公開（公告）號: CN112280897A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 鄭江花;朱娟娟;李烈軍;謝龍旭
• 申請（專利權）人: 上海市浦東新區周浦醫院;廣州凱普醫藥科技有限公司;上海凱普醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/689;C12Q1/6837;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 孫鳳俠

本發明公開了一種呼吸道感染病原體核酸聯合檢測試劑盒。本發明開發了一組利用多重熒光定量PCR技術與導流雜交基因芯片技術相結合檢測新型冠狀病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、人副流感病毒、腺病毒、肺炎支原體和肺炎衣原體多種呼吸道感染病原體的引物與探針組合，其核苷酸序列依次如SEQ ID NO：1～36所示。并構建了呼吸道感染病原體核酸聯合檢測試劑盒，該試劑盒能夠實現對8種呼吸道感染病原體的同步聯合檢測，檢測準確性好、特異性強、靈敏性高，重復性好、假陰性及假陽性低，且檢測所需時間短、成本低，能夠對患者進行全面的檢測，準確定位致病源，及時治療或進行相應的隔離措施，對于有效控制呼吸道感染以防止相關傳染感染爆發具有重要意義。

技術領域

本發明屬于生物醫學及臨床診斷技術領域。更具體地，涉及一種呼吸道感染病原體核酸聯合檢測試劑盒。

背景技術

呼吸道感染(Respiratory tract infection，RTI)是人類最常見的一類疾病，可以在任何性別、年齡和地域中發生，是全球范圍內引起人群發病和死亡的最主要原因之一。呼吸道感染引起的臨床癥狀和體征都較為相似，其臨床表現主要為鼻炎、咽炎、喉炎、扁桃體炎等癥狀，嚴重的可引起氣管炎、支氣管炎及肺炎等，但不同病原體引起的感染，其治療方法、療效和病程也不盡相同。目前已證明，大部分呼吸道疾病是由細菌外的病原體引起，其中以呼吸道病毒最常見。

常見的呼吸道病毒有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等，除病毒外，肺炎支原體和肺炎衣原體也可引起呼吸道感染。流感病毒和副流感病毒主要引起上呼吸道感染，每年冬春季，小孩、老人及長期患有心血管肺炎的病人易于被甲乙流感染。季節性流感通常是由亞型H1、H2、H3、N1和N2引起的。除季節性流感外，2009年初在美國還在人類中發現了新型的H1N1病毒株。副流感病毒(PIV)包含四種亞型，1型和2型的最典型的臨床特征是造成兒童喉氣管支氣管炎，3型經常導致肺炎和細支氣管炎，其致病性僅次于呼吸道合胞病毒(RSV)。RSV可引起上下呼吸道疾病，從新生兒到成人任何年齡段都有被感染的可能。我國每年數千萬住院的嬰幼兒因RSV感染的占50％，且RSV的再感染率很高，成人RSV的再感染同樣很常見。腺病毒(ADV)易侵犯呼吸道消化道黏膜、眼結膜以及淋巴結等。主要表現為上呼吸道感染，容易侵犯6個月至5歲兒童，占兒童呼吸道感染5％～20％。肺炎支原體(MP)是造成人類支原體肺炎的病原體，是兒童和成人社區獲得性肺炎的常見病原體。肺炎衣原體(CP)可引起急慢性呼吸道疾病，社區獲得性肺炎、支氣管炎和鼻竇炎。

目前，新型冠狀病毒(2019-nCoV)在中國的感染病死率約為2.1％，然而新型冠狀病毒的傳染性極強，遠遠超過SARS-CoV和MERS-CoV。面對當前新型冠狀病毒在中國乃至世界蔓延的勢頭，人類卻缺乏有效的抗病毒疫苗和特效藥物，當前對感染者或攜帶者準確檢測診斷對于疫情控制具有至關重要的作用及意義。

以上呼吸道感染的病原體在早期臨床表現較為相似，患者均表現為發熱，并伴有呼吸道感染癥狀，依靠臨床癥狀進行鑒別診斷難度較大，在無病原學資料的情況下臨床對呼吸道感染疾病盲目使用抗生素的現象非常普遍。因此，應用靈敏度與特異性較好的診斷技術對呼吸道感染疾病的病原體進行檢測，對疾病的早期診斷、早期治療、早期隔離至關重要。然而，在在呼吸道感染的臨床檢測中，單一檢測一種呼吸道感染的病原體，費時、費力、檢測成本高。目前，多重檢測主要基于免疫學方法的抗原或者抗體檢測，而免疫學方法靈敏度和特異性較低，且抗體檢測存在窗口期，對疾病早期診斷易漏診。

因此，建立一種基于核酸技術對新冠病毒和流感病毒等其他呼吸道病毒區別檢測診斷的方法，對于實現患者的精準診斷及后續的精準治療具有重要指導意義。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有關于新冠病毒和流感病毒等其他呼吸道病毒區別檢測診斷技術的缺陷和不足，提供一種呼吸道感染病原體核酸聯合檢測試劑盒。

本發明的目的是提供一種呼吸道感染病原體核酸聯合檢測引物與探針組合。