[發(fā)明專利]一種馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留量的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011097237.8
• 申請日: 2020-10-14
• 公開（公告）號: CN112255342B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宋偉;韓芳;肖亞兵;丁磊;劉宇欣;呂亞寧;周典兵;鄭平;趙霞;劉會佳
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥海關(guān)技術(shù)中心;天津海關(guān)動植物與食品檢測中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司 34101
• 代理人: 盧敏

本發(fā)明公開了一種馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留量的測定方法，其步驟為：將冷藏保存的待測馬鈴薯樣品避光切塊后，加干冰粉碎，獲得試樣；在試樣中加入抗壞血酸水溶液適當(dāng)水解后，加入甲酸乙腈溶液超聲萃取，再加入氯化鈉渦旋振蕩后離心，所得上清液凈化后，稀釋并進行HPLC?MS/MS分析，從而確定樣品中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑的殘留量。本發(fā)明解決了馬鈴薯中丙硫菌唑難以有效提取檢測的技術(shù)難題，可用于馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留量的同時快速提取、凈化及準(zhǔn)確定性定量，方法靈敏、準(zhǔn)確度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品中農(nóng)藥殘留富集凈化、檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留量的測定方法。

背景技術(shù)

農(nóng)藥殘留分析是一項對復(fù)雜混合物中痕量組分的分析技術(shù)。樣品用量少、試劑消耗少、分析速度快是農(nóng)藥化學(xué)污染物殘留檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢。如何實現(xiàn)多殘留分析，在有效地去除雜質(zhì)的同時又保證回收率，是整個前處理過程的難點。

近年來，丙硫菌唑在谷物等農(nóng)產(chǎn)品中廣泛應(yīng)用，其在植物源性食品中的主要代謝產(chǎn)物為硫酮菌唑(Prothioconazole-desthio)。國際食品法典委員會(CAC)規(guī)定丙硫菌唑在果蔬、瓜類中的殘留限量為0.2mg/kg(西瓜除外)。然而丙硫菌唑在馬鈴薯基質(zhì)中不穩(wěn)定，常規(guī)方法并不能對其有效提取檢測，當(dāng)前也沒有馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留測定方法的詳細(xì)研究報道。

發(fā)明內(nèi)容

基于上述現(xiàn)有技術(shù)所存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留量的測定方法，以解決馬鈴薯中丙硫菌唑不穩(wěn)定而難以有效提取檢測的技術(shù)難題，實現(xiàn)馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留的快速提取、凈化及準(zhǔn)確定性定量測定。

為解決技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明公開了一種馬鈴薯中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑殘留量的測定方法，其特點在于：將冷藏保存的待測馬鈴薯樣品避光切塊后，加干冰粉碎，獲得試樣；在試樣中加入抗壞血酸水溶液適當(dāng)水解后，加入甲酸乙腈溶液超聲萃取，再加入氯化鈉渦旋振蕩后離心，所得上清液凈化后，稀釋并進行HPLC-MS/MS(液相色譜三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜)分析，從而確定樣品中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑的殘留量。具體操作步驟如下：

步驟1、制樣

將冷藏保存的待測馬鈴薯樣品(500g以上)取出后，避光快速切塊混勻放入粉碎機，加入適量干冰全部粉碎，獲得試樣；

步驟2、萃取

稱取適量試樣，置于具塞棕色離心管中，加入抗壞血酸水溶液并渦旋混勻后進行水解，再加入甲酸乙腈溶液，超聲提取；之后向離心管中加入適量氯化鈉，渦旋振蕩后以不低于4000r/min的轉(zhuǎn)速4℃離心，取上清液待凈化

步驟3、凈化

取步驟2所得上清液放入裝有C₁₈、PSA和無水硫酸鎂的離心管中，渦旋振蕩，然后以不低于8000r/min的轉(zhuǎn)速4℃離心，取上清液待檢測；

步驟4、檢測

取步驟3所得上清液用純水稀釋1倍，所得稀釋液過0.22μm有機系濾膜至棕色樣品瓶，經(jīng)HPLC-MS/MS分析，從而確定待測樣品中丙硫菌唑及其代謝物硫酮菌唑的殘留量。

進一步地，步驟1中，所述冷藏保存的待測馬鈴薯樣品是在2-4℃冰箱中冷藏2h以上的樣品。

進一步地，步驟2的具體條件為：稱取5g試樣，置于具塞棕色離心管中，加入10mL濃度為15μg/mL的抗壞血酸水溶液渦旋混勻后，放入30℃水浴中水解20-40min，水解過程中每10min振蕩混勻一次；水解后加入10mL體積濃度為1％的甲酸乙腈溶液超聲提取10min；再向離心管中加入5g氯化鈉，渦旋振蕩1min后，以不低于4000r/min的轉(zhuǎn)速4℃離心，取上清液待凈化