[發(fā)明專利]一種多肽固液組合合成鮭魚促性腺激素釋放激素的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011087668.6
• 申請日: 2020-10-12
• 公開（公告）號: CN112094325A
• 公開（公告）日: 2020-12-18
• 發(fā)明（設計）人: 孫鵬程
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南津安生物科技有限公司
• 主分類號: C07K7/23
• 分類號: C07K7/23;C07K1/34;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 長沙科明知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 43203
• 代理人: 彭乃恩

本發(fā)明提供一種多肽固液組合合成鮭魚促性腺激素釋放激素的方法，該固液組合合成鮭魚促性腺激素釋放激素的方法包括以下步驟：1)用多肽固相法合成化合物1：Boc?Pyr?His(Boc)?Trp(Boc)?Ser(tBu)?Tyr(tBu)?Gly?Trp(Boc)?Leu?OH；2)用多肽液相法合成化合物2：H?Pro?Gly?NH₂；3)在液相中合成化合物3：Boc?Pyr?His(Boc)?Trp(Boc)?Ser(tBu)?Tyr(tBu)?Gly?Trp(Boc)?Leu?Pro?Gly?NH₂；4)合成鮭魚促性腺激素釋放激素粗品：Pyr?His?Trp?Ser?Tyr?Gly?Trp?Leu?Pro?Gly?NH₂；本發(fā)明首次用CTC樹脂合成片段，結(jié)合液相法合成鮭魚促性腺激素釋放激素；CTC樹脂合成片段可以方便自動化生產(chǎn)；CTC樹脂可以回收重復利用，極大降低了文獻用Rink樹脂進行固相合成的成本，Rink樹脂的價格要比CTC樹脂高很多，并且不能回收再次使用；適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，沒有劇烈的化學反應；和目前文獻報道的工藝相比，降低了生產(chǎn)成本。

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領域，具體涉及一種多肽固液組合合成鮭魚促性腺激素釋放激素的方法。

背景技術(shù)

促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasinghormone，GnRH)由下丘腦分泌，刺激或抑制垂體促性腺激素的分泌，有相當?shù)幕钚詽撃堋４傩韵偌に蒯尫偶に仡愃莆?GnRHa)可以直接作用于腫瘤組織，引起細胞的凋亡。促性腺激素在胚胎工程重要用途。向雌性動物注射促性腺激素，可以促進其超數(shù)排卵。對供體雌性動物和受體動物注射促性腺激素，可以促進其同期發(fā)情，從而提高胚胎在受體雌性動物體內(nèi)的成活幾率。使下丘腦分泌產(chǎn)生的神經(jīng)激素，對脊椎動物生殖的調(diào)控起重要作用。為10個氨基酸的肽，目前已能人工合成。能使黃體生成素釋放，也能使促卵泡激素釋放。較集中分布于正中隆起外側(cè)區(qū)，弓狀核、下丘腦視前區(qū)、多突室管膜細胞、松果體等處也有分布。

而對于現(xiàn)代的魚類養(yǎng)殖業(yè)而言，通過鮭魚促性腺激素釋放激素促進親魚性腺發(fā)育的目的，使親魚發(fā)育速度快，成熟率高，性腺指數(shù)高。來提高人工繁殖的成功率批量獲得優(yōu)質(zhì)受精卵，有很高的市場價值。

比如中國鯉科養(yǎng)殖魚類的繁殖一般采用人工繁殖生理生態(tài)法，整個過程分親魚培育、催情、授精和孵化4個環(huán)節(jié)。①親魚培育。是將達到性成熟年齡的親魚培育至性腺發(fā)育成熟的過程。②催產(chǎn)。對卵巢出現(xiàn)上述性狀的親魚，須注射催產(chǎn)劑促其發(fā)情、產(chǎn)卵。③授精。有自然授精和人工授精兩種。自然授精是催產(chǎn)后的親魚在產(chǎn)卵池中自行產(chǎn)卵、排精、完成受精作用。人工授精是在親魚發(fā)情高潮將要產(chǎn)卵時，進行采卵、采精，使成熟的精、卵在盛器內(nèi)完成授精作用。④孵化。將受精卵置于孵化環(huán)道、孵化桶等工具中進行。

采用以上常規(guī)的魚類人工繁殖方法實施烏原鯉的人工繁殖，存在魚卵受精率低，易感染水霉菌，孵化率低，魚苗成活率低的問題，難以大規(guī)模生產(chǎn)魚苗。

在這種情況下，通過強化親魚培育管理，選擇成熟親魚，注射適合的催情劑及劑量促其發(fā)情、產(chǎn)卵，采用人工授精、脫粘提高受精率，調(diào)節(jié)孵化器水的流速，預防卵膜早破，可以實現(xiàn)魚苗魚種的規(guī)模化生產(chǎn)。

而現(xiàn)有的鮭魚促性腺激素合成技術(shù)相關報道極少，因此市場需要一種生產(chǎn)成本相對較低的適合工業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)的合成工藝。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要針對背景技術(shù)中存在的問題，提供一種多肽固液組合合成鮭魚促性腺激素釋放激素的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是構(gòu)造一種多肽固液組合合成鮭魚促性腺激素釋放激素的方法，包括以下步驟：

1)用多肽固相法合成化合物1：Boc-Pyr-His(Boc)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Gly-Trp(Boc)-Leu-OH；

2)用多肽液相法合成化合物2：H-Pro-Gly-NH₂；