[發明專利]一種滅活疫苗佐劑白油檢驗方法

在審

• 申請號: 202011082196.5
• 申請日: 2020-10-12
• 公開（公告）號: CN112213438A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 王林浩;藺凡
• 申請（專利權）人: 青島易邦生物工程有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

本發明提供一種滅活疫苗佐劑白油檢驗方法，其中確定白油樣品是否合格的標準，是碳鏈正構烷烴C15～C20和值標準為46.28～58.36％。本發明所提供的檢測方法，是將將待檢測的白油樣品使用有機溶劑進行稀釋，作為待檢測的油樣；然后將油樣放入氣相色譜儀中進行檢測，通過氣相色譜儀的數據分析系統對結果進行整理及分析,對C15?C20正構烷烴含量進行和值分析,確定白油是否在標準規定范圍內。本發明所建立的檢測方法和檢測標準能準確分析出各種廠家及白油類型的內在差異，分析出以C14?C24正異構烷烴出峰時間及含量，在研究白油組分上有顯著的成效，該研究為對滅活疫苗佐劑白油檢驗提供基礎。

技術領域

本發明屬于疫苗佐劑檢驗技術領域，具體涉及一種滅活疫苗佐劑白油檢驗方法。

背景技術

動物疫苗用油乳佐劑，是一種先于或與抗原同時使用，能夠增強機體的非特異性免疫能力及抗原的免疫原性，而自身不具備抗原特性的物質。油乳佐劑疫苗是使用礦物油和乳化劑作為免疫增強劑的疫苗，該類佐劑能使抗原在注射部位持續穩定釋放，為抗原在淋巴系統中轉運提供載體，增加單核細胞的形成和聚集，提高疫苗的免疫效力，是目前國內外疫苗市場上產品最多的類型之一。隨著禽流感等流行病在全球范圍內的流行,生產免疫效果好的滅活疫苗的需求日益迫切。隨著抗原純度越來越高,亞單位疫苗、合成肽疫苗等被廣泛應用，佐劑增強抗原的免疫原性的作用顯得尤為重要。

油乳佐劑可以使多種抗原產生高滴度抗體,是動物疫苗中應用最廣泛的佐劑之一。作為油乳佐劑的主要原料,白油的組分及其乳化穩定性對疫苗的活性有著重要影響。

白油，是碳氫化合物，成分除含量極其微小的雜質除外，均為碳和氫兩種元素，一般動物疫苗生產使用的白油碳鏈維持在19碳左右。

白油的品質對于疫苗的免疫效果具有一定的影響，一款好的白油不僅需要檢驗其理化指標，其內在組分也是重中之重，因此開發一種檢驗檢驗白油組分的方法對于白油在疫苗方面的應用至關重要。

發明內容

本發明的目的是提供一種滅活疫苗佐劑白油檢驗方法，能夠有效的檢驗佐劑注射用白油的質量，從而彌補現有技術的不足。

本發明首先提供一種用于確定疫苗注射用佐劑白油質量的標準，所述的標準，是碳鏈正構烷烴C15～C20和值標準為46.28～58.36％；

本發明還提供一種檢測疫苗佐劑白油的方法，包括如下的步驟：

1)將待檢測的白油樣品使用有機溶劑進行稀釋，作為待檢測的油樣；

所述的有機溶劑，在一個實施例中的具體記載為正己烷；

所述的正己烷與待檢測的白油樣品的體積比，優選為100:1；

2)將步驟1)所獲得的油樣放入氣相色譜儀中進行檢測，其中色譜柱為5％苯基-甲基聚硅氧烷毛細管柱色譜柱；色譜條件如下：起始溫度為50℃，進樣量為0.1μl，以每分鐘10℃的速率升溫至100℃，再以每分鐘5℃的速率升溫至320℃，維持9分鐘；進樣口溫度為350℃；檢測器溫度為350℃；

所述的色譜柱的標準如下：0.32mm×30mm，膜厚度0.25μm；

3)通過氣相色譜儀的數據分析系統對結果進行整理及分析,分析出C8-C40正異構烷烴出峰時間及含量,并對C15-C20正構烷烴含量進行和值分析,確定白油是否在標準規定范圍內；如C15-C20正構烷烴的值標準為46.28～58.36％，則待檢測的白油為合格白油。

本發明所建立的檢測方法和檢測標準能準確分析出各種廠家及白油類型的內在差異，分析出以C14-C24正異構烷烴出峰時間及含量，在研究白油組分上有顯著的成效，該研究為對滅活疫苗佐劑白油檢驗提供基礎。

附圖說明

圖1：23種正構烷烴混標C8-C40出峰時間及含量數據圖；