[發明專利]一種用于動脈粥樣硬化早期預警的分子標志物及其應用

在審

• 申請號: 202011080892.2
• 申請日: 2020-10-11
• 公開（公告）號: CN112159842A
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 姜怡鄧;張慧萍;張輝;劉圓;馬芳;楊安寧;馬勝超
• 申請（專利權）人: 寧夏醫科大學;寧夏醫科大學總醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/113;C12N15/11;A61K45/00;A61K31/713;A61P9/10
• 代理公司: 寧夏合天律師事務所 64103
• 代理人: 郭立寧

一種用于動脈粥樣硬化早期預警的分子標志物，包括：（1）MTT比色法檢測不同濃度的Hcy對內皮細胞增殖影響，篩選合適濃度；（2）最適濃度Hcy干預細胞后，細胞活力染色檢測；（3）最適濃度Hcy干預細胞后，流式細胞術檢測內皮細胞凋亡；（4）最適濃度Hcy干預細胞后，實時熒光定量PCR檢測LncRNA DINO的表達；（5）轉染LncRNA DINO siRNA，干擾LncRNA DINO后，細胞活力染色檢測；（6）構建LncRNA DINO siRNA，干擾LncRNA DINO后，流式細胞術檢測內皮細胞凋亡；（7）構建LncRNA DINO siRNA，干擾LncRNA DINO后，蛋白免疫印跡檢測凋亡相關蛋白的表達。本發明為動脈粥樣硬化的早期診斷及預警提供了新的分子靶標，也為治療提供了新的方向。

技術領域

本發明屬于醫學技術領域，具體地說，涉及一種用于動脈粥樣硬化早期預警的分子標志物及其應用。

背景技術

動脈粥樣硬化(Atherosclerosis, AS)是一種以內皮細胞凋亡、平滑肌細胞增殖、泡沫細胞形成為主要特征的好發于大中型動脈的慢性進行性疾病，是造成世界范圍內心腦血管疾病高發病率和死亡率的主要原因。近年來，隨著社會經濟的快速發展，人們生活水平不斷提高，受飲食結構改變、工作壓力增加等因素影響，AS (動脈粥樣硬化)發病率呈現逐年上升的趨勢且逐步向年輕化發展，可見早期發現、預防并延緩動脈粥樣硬化的進程是當今臨床科學領域的重中之重。因此，尋找一種動脈粥樣硬化的早期標志物，對動脈粥樣硬化的預防和早期診斷具有重要的意義。

動脈粥樣硬化的發生機理復雜，目前存在多種假說：炎癥假說、脂質浸潤假說（脂源性學說）、血管平滑肌細胞單克隆假說、內皮細胞功能紊亂假說等。動脈的血管內皮細胞功能及結構的完整，能維持血管的正常收縮、舒張及內分泌功能，能阻止血液中各種細胞（單核細胞、中性粒細胞、紅細胞等）及各種物質（甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白等）向內膜下的遷徙移位堆積，為動脈血管壁提供天然保障。作為血管壁天然屏障的內皮細胞，其功能障礙所導致的一系列后續連鎖反應（釋放趨化因子、單核細胞遷徙增生分化、巨噬細胞吞噬脂質成泡沫細胞等）是動脈粥樣硬化發病的初始和必要步驟，因此內皮細胞的凋亡對于動脈粥樣硬化的發生發展關系密切。

同型半胱氨酸（Homocysteine, Hcy）是體內蛋氨酸代謝途徑中形成的一種含硫氨基酸，機體不能自身合成，屬于蛋氨酸循環的中間產物。近年來流行病學研究表明，高同型半胱氨酸血癥（Heromoeysteinmeia, HHcy）是動脈粥樣硬化性心血管疾病的獨立危險因素。流行病學調查發現，血漿中Hcy（同型半胱氨酸）每升高5μmol/L，腦卒中風險增加59%；Hcy每降低3μmol/L，可減少腦卒中風險約為24%；高血壓合并高Hcy血癥患者的心血管事件發生率也較單純高血壓患者高3倍，較正常人高12-25倍，因此探尋防治高Hcy血癥對動脈粥樣硬化性心血管疾病的影響顯得尤為重要。