[發明專利]病毒BVDV、BRV和BCV一管多重熒光PCR檢測的專用引物及其應用

有效

• 申請號: 202011079561.7
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112176105B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 常麗云;劉志勇;秦建華;李穎;趙月蘭
• 申請（專利權）人: 河北農業大學;唐山市動物疫病預防控制中心（唐山市畜牧獸醫研究所）
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 李興林

1.病毒BVDV、BRV和BCV一管多重熒光PCR檢測的專用引物，其特征在于，所述專用引物的序列如SEQ ID NO.1-6所示，其中：

BVDV上游引物SEQ ID NO.1：5’-GGTCATAGCTCTCGACACCA-3’；

BVDV下游引物SEQ ID NO.2：5’-GAGCACGTATCTACCACCCA-3’；

BRV上游引物SEQ ID NO.3：5’-AGACAAAGAACGGGTTTCACA-3’；

BRV下游引物SEQ ID NO.4：5’-AGTCAAATCCAGCGACCTGA-3’；

BCV上游引物SEQ ID NO.5：5’-GCGTCCTCTGGAAATCGTTC-3’；

BCV下游引物SEQ ID NO.6：5’-AGCAGTTTGCTTGGGTTGAG-3。

2.根據權利要求1所述的專用引物，其特征在于，利用所述專用引物進行一管多重熒光PCR的反應體系為25μL：PerfectStartTM Green SuperMix 12.5μL，BVDV、BRV、BCV上下游引物各0.5μL，檢測樣品1.0μL，去離子水3.5μL。

3.根據權利要求2所述的專用引物，其特征在于，所述一管多重熒光PCR的反應程序為95℃5min，95℃20s，55℃20s，72℃20s，共45個循環。

4.根據權利要求3所述的專用引物，其特征在于，進行一管多重熒光PCR時設置無菌水為陰性對照。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的專用引物在制備檢測病毒BVDV、BRV和BCV產品中的應用。