[發明專利]鉤毛茜草中3個化合物及提取分離方法

有效

• 申請號: 202011078958.4
• 申請日: 2020-10-10
• 公開（公告）號: CN112194690B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 馬雪;李勇軍;汪洋;潘潔;劉春花;王愛民;陸苑;孫佳
• 申請（專利權）人: 貴州醫科大學
• 主分類號: C07H15/244
• 分類號: C07H15/244;C07H1/08
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李余江

本發明公開了一種鉤毛茜草中3個新化合物及提取分離方法，本發明提供的新化合物命名為：2?甲基?1,6?二羥基?9,10?蒽醌?3?木糖?(1→2)?β?D?葡萄糖(1)、1,3,6?三羥基?2?羥甲基?9,10?蒽醌?3?O?β?D?葡萄糖(2)、1?羥基?2?羥甲基?9,10?蒽醌?11?O?β?D?葡萄糖(3)。本發明采用現代波譜技術如¹HNMR、¹³CNMR、二維核磁譜、高分辨質譜、化合物的理化性質對分離得到的單體化合物進行結構鑒定，推導出該化合物的分子結構，為鉤毛茜草的進一步質量控制和藥效研究提供了物質基礎。

技術領域

本發明涉及中藥提取、分離領域，尤其涉及從鉤毛茜草藥材中提取、分離和鑒別出的新化合物及其提取分離方法。

背景技術

鉤毛茜草為茜草科(Rubiaceae)茜草屬(Rubia)植物鉤毛茜草(Rubi aoncotricha Hand.-Mazz.)的干燥根及根莖，分布于我國貴州西南部、云南東北部至東南部和廣西西北部和西南部等，收載于《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》(2003年版)中，為貴州省少數民族藥，具有涼血止血，止咳祛痰等功效，用于吐血、衄血、跌打損傷等病癥。現代研究發現鉤毛茜草中主要成分為萘醌類、蒽醌類、萜類及二聚體類化合物等。

目前對鉤毛茜草的化學成分研究較少，僅有Itokawa Hideji組及譚寧華組對該種進行研究，發現主要成分為萘醌類、蒽醌類、萜類及二聚體類化合物，然而分離鑒定化合物數量較少。

發明內容

本發明結合民間用藥方法(水煎煮或酒泡)，對鉤毛茜草藥材70％乙醇提取物的正丁醇萃取部位進行化學成分研究，提供一種鉤毛茜草中三個新化合物，同時提供一種針對本發明新化合物的簡便、快速的提取分離方法，以實現豐富鉤毛茜草藥材的物質成分，為后期藥效物質基礎的研究提供理論依據的目的。

為實現本發明的上述目的，本發明的技術方案：

本發明提供的新化合物命名為：2-甲基-1,6-二羥基-9,10-蒽醌-3-木糖-(1→2)-β-D-葡萄糖(1)、1,3,6-三羥基-2-羥甲基-9,10-蒽醌-3-O-β-D-葡萄糖(2)、1-羥基-2-羥甲基-9,10-蒽醌-11-O-β-D-葡萄糖(3)，結構式為：

本發明還提供一種鉤毛茜草中化合物提取分離方法，具體步驟如下：

步驟1、將干燥的鉤毛茜草根及根莖切成小段，用70％乙醇回流提取3次，第一次10倍量體積提取2h，第二次8倍量體積提取1.5h，第三次8倍量體積提取1.5h，合并3次提取液，減壓回收乙醇并揮至無醇味得浸膏。

步驟2、將浸膏用水溶解分散，然后依次分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，分別得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。

步驟3、取正丁醇段，經正相硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇(50:1～1:1)梯度洗脫，再通過薄層色譜檢測，再通過不同的顯色方式看成分相似情況，相似成分進行合并，得到7個組分Fr.1～Fr.7。

步驟4、將Fr.2經正相硅膠柱色譜，乙酸乙酯-甲醇(15:1-1:1)洗脫，薄層色譜檢測合并相同組分，得到若干個組分。將其中某一組分經正相硅膠柱色譜，以乙酸乙酯-甲醇(8:1)洗脫得不同的亞組分，然后再將某個亞組分經正相硅膠柱色譜，二氯甲烷：甲醇(8:1-4:1)梯度洗脫，再經Toyopearl HW-40F柱色譜，分別以甲醇、氯仿：甲醇(1:1)洗脫得化合物1。

步驟5、將Fr.4經Sephadex LH-20柱色譜，甲醇洗脫，薄層色譜檢測合并相同流分，得到若干組分。將其中某一組分經Toyopearl HW-40F柱色譜，甲醇洗脫得到不同的亞組分，然后將某個亞組分分別經MCI柱色譜，甲醇-水洗脫、Toyopearl HW-40F柱，甲醇洗脫得化合物2。