[發明專利]一種新型冠狀病毒檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011069524.8
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112162092A
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 陳浪;王麗
• 申請（專利權）人: 北京金沃夫生物工程科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/577;G01N33/532
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 吳靜安

1.一種新型冠狀病毒檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑盒包括抗原檢測試紙；所述抗原檢測試紙包括襯片、吸水紙、免疫硝酸纖維素膜、免疫微球墊，所述免疫微球墊、免疫硝酸纖維素膜和吸水紙粘貼在所述襯片上；所述免疫微球墊上包被有乳膠微球標記的新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體1；所述免疫硝酸纖維素膜上設有包被有新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體2的檢測線和包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體的質控線。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述乳膠微球采用直徑為290-300nm的紅色乳膠微球。

3.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒通過以下方法制備：

(1)免疫微球墊的制備：用乳膠微球標記新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體1，制備免疫微球溶液，包被至釋放墊上制備免疫微球墊；

(2)免疫硝酸纖維素膜的制備：分別采用新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體2羊抗鼠IgG多克隆抗體配置檢測線溶液和質控線溶液，包被至免疫硝酸纖維素膜上；

(3)抗原檢測試紙的制備：將免疫微球墊、免疫硝酸纖維素膜、吸水紙粘貼在襯片上制備檢測試紙半成品板；將檢測試紙半成品板分切制備條狀抗原檢測試紙。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述乳膠微球標記新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體1的具體方法為：

a、乳膠微球預處理：取乳膠微球溶液用標記緩沖液MES進行洗滌；

b、EDC活化：將步驟(a)預處理后的乳膠微球加入標記緩沖液MES，然后加入EDC和NHS溶液混合反應；

c、乳膠標記：將反應后的混合溶液離心，取沉淀加入MES緩沖液復溶，并超聲均勻，加入新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體1，反應；

d、封閉：加入氨基乙醇溶液，反應，封閉；離心，棄上清液，沉淀備用；

e、離心純化：將沉淀用TBS緩沖液復溶，超聲均勻即得所免疫微球溶液。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述EDC的用量與乳膠微球的質量比為100:1。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述新型冠狀病毒2019-nCoV單克隆抗體1的用量與乳膠微球的質量比為2:1。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述步驟(c)中乳膠標記的反應時間為3-5小時。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述步驟(c)中乳膠標記的反應時間為4小時。

9.根據權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述步驟(1)免疫微球墊的制備過程中，免疫微球溶液于釋放墊的噴量為2.5-3.0ul/cm，噴點后得到的免疫微球墊于38-42℃下干燥4-16小時；所述步驟(2)免疫硝酸纖維素膜的制備過程中，檢測線溶液和質控線溶液為2.0-2.5mg/ml，并將制備得到的免疫硝酸纖維素膜于38-42℃下干燥4-16小時。

10.根據權利要求1至9任一所述的試劑盒，其特征在于，檢測試劑盒還包括樣本抽提液，所述樣本抽提液以0.15M Nacl為基礎溶液，并含有曲拉通-100和NP-40；所述曲拉通-100。

在樣本抽提液中的濃度為0.5％，NP-40在樣本抽提液中的濃度為1％。