[發明專利]一種利用全細胞轉化制備覆盆子酮的方法

有效

• 申請號: 202011064833.6
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112126614B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 鄭璞;楊波;吳丹;陳鵬程
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/70;C12N15/53;C12P7/26;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，將重組大腸桿菌培養后得到的濕菌體，添加至含有對羥基亞芐基丙酮和葡萄糖的反應體系中，進行轉化反應；所述重組大腸桿菌以E.coli BL21(DE3)為宿主，pRSFDuet-1為表達載體，共表達核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示的芐基丙酮還原酶和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的葡萄糖脫氫酶；編碼所述芐基丙酮還原酶的基因位于編碼所述葡萄糖脫氫酶的基因的下游。

2.根據權利要求1所述的一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，所述重組大腸桿菌的培養條件如下：將重組大腸桿菌接種至培養基中，得到種子液；將種子液按照體積分數2～5％的接種量接種至TB液體培養基中，于35～39℃下，200～230rpm搖床培養1～2h，至OD600為0.3～1.8，得到培養液；向得到的培養液中加入終濃度為0.4～1.4mmol·L^-1的誘導劑，在16～25℃下200～230rpm，搖床誘導培養5～7小時，得到發酵液；將發酵液離心，取濕菌體。

3.根據權利要求2所述的一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，反應體系中，濕菌體的濃度為100～200g/L。

4.根據權利要求3所述的一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，反應體系中，對羥基亞芐基丙酮和葡萄糖摩爾比為1:3～3:1。

5.根據權利要求3所述的一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，反應體系中對羥基亞芐基丙酮的濃度為1～20g/L。

6.根據權利要求3所述的一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，反應體系中葡萄糖的濃度為20～300mM。

7.根據權利要求1～6任一所述的一種全細胞轉化生產覆盆子酮的方法，其特征在于，反應溫度為25-55℃。

8.權利要求1～6任一所述的方法在制備含覆盆子酮的食品、藥品方面的應用。