[發明專利]一種四環素發酵用混合氮源及其在四環素發酵中的應用方法

有效

• 申請號: 202011064224.0
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112266946B
• 公開（公告）日: 2022-12-30
• 發明（設計）人: 郭海燕;孫瑞君;朱娜;張志;胡曉玲;馮占梅
• 申請（專利權）人: 寧夏啟元藥業有限公司
• 主分類號: C12P29/00
• 分類號: C12P29/00;C12N1/20;C12R1/485
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本發明涉及一種四環素發酵用混合氮源及其在四環素發酵中的應用方法，本發明將由豆粕粉、玉米胚芽粉、尿素、磷酸二氫鉀和葡萄糖組成的混合物用乳酸桿菌發酵降解成混合氮源，作為四環素發酵基礎料及補料的新型有機氮源使用，其中應用在發酵基礎料中，能使發酵初級代謝達到一定的菌體量并維持良好的菌體質量；應用在補料中，可促進菌體由初級代謝進入次級代謝時的代謝產物合成，提高菌體產素能力；尤其是該新型混合氮源在發酵后期能夠得到充分徹底利用，降低發酵結束時的物質殘留，最終有效降低原材料成本，并縮短發酵周期，提高發酵效率。

技術領域

本發明屬于生物與新醫藥技術領域，特別是涉及一種四環素發酵用混合氮源及其在四環素發酵中的應用方法。

背景技術

氮源是生物發酵過程中必不可少的元素。常用的氮源分為有機氮源和無機氮源，其中有機氮源為遲效氮源，含有少量糖類、脂肪、無機鹽和生長因子，在生物代謝中作為構成微生物細胞或代謝產物中的氮素，同時也可以是培養基中碳源不足時作為碳源的碳架補充。

四環素是一類四環類抗生素，常采用生物發酵法(金色鏈霉菌為發酵菌株)生產。生物發酵過程中使用大量黃豆餅粉、玉米漿、酵母粉等農副產品作為主要的氮源物質，供菌體生長繁殖，并在一定時期達到一定的菌絲量，使其代謝合成有效目標產物。目前，四環素發酵過程中有機氮源黃豆餅粉、玉米漿、酵母粉等農副產品的用量約占原材料總量的20～30％，就其成本來說就占總原材料成本的15～25％，而且農副產品本身存在質量穩定性差的缺陷，其質量的波動會給發酵帶來巨大損失，同時黃豆餅粉、酵母粉等還存在代謝緩慢、利用不徹底等問題，致使發酵周期延長，發酵結束時殘留量高，給發酵后的提取及環保處理造成困難，并形成新的浪費。因此，在四環素發酵過程中減少發酵代謝波動，降低遲效氮源殘留，縮短發酵周期，提高發酵效率是本行業需要解決的主要問題。

發明內容

本發明的目的就在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種四環素發酵用混合氮源，通過該混合氮源的使用以減少發酵代謝波動及氮源殘留，縮短發酵周期，提高發酵效率。

本發明的另一目的是提供上述混合氮源在四環素發酵中的應用方法。

為實現上述發明目的，本發明所采取的技術方案為：

一種四環素發酵用混合氮源，其特征在于該混合氮源是將由豆粕粉、玉米胚芽粉、尿素、磷酸二氫鉀和葡萄糖組成的混合物用乳酸桿菌發酵降解而成。

所述混合氮源的原料組成為：豆粕粉1.0～2.0％，玉米胚芽粉2.5～3.5％，尿素0.1～0.5％，磷酸二氫鉀0.01～0.05％，葡萄糖0.5～1.0％，按重量體積比配制。

所述混合氮源的發酵培養過程為：將豆粕粉、玉米胚芽粉、尿素、磷酸二氫鉀和葡萄糖按比例配料，然后接入1～3％乳酸桿菌活化液，在溫度38±2℃，攪拌狀態下密閉培養7～10天即可。

上述混合氮源在四環素發酵中的應用，其特征在于，以金色鏈霉菌為菌種發酵生產四環素的過程中，將所述混合氮源作為四環素發酵基礎料及補料的有機氮源使用。

將混合氮源應用于四環素發酵基礎料時，發酵基礎料組成為：淀粉6.0～8.0％，混合氮源3.0～4.0％，硫酸銨0.4～0.6％，碳酸鈣0.5～0.7％，溴化鈉0.2～0.35％，M-促進劑0.002～0.003％，按重量體積比配制。

將混合氮源應用于四環素發酵補料時，補料培養基組成為：淀粉20～30％，中溫淀粉酶為淀粉量的3‰，混合氮源2.0～3.0％，溴化鈉0.2～0.3％，M-促進劑0.002～0.003％，適量消沫劑，按重量體積比配制。