[發明專利]根癌農桿菌的微滴數字PCR檢測引物探針組、試劑盒及其應用有效
| 申請號： | 202011056966.9 | 申請日： | 2020-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN112126697B | 公開（公告）日： | 2022-09-13 |
| 發明（設計）人： | 武瑤;王莉;蘇鸓;崔璇;王忠勤 | 申請（專利權）人： | 中國科學院微生物研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 商秀玲 |
| 地址： | 100101 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 根癌農 桿菌 數字 pcr 檢測 引物 探針 試劑盒 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種根癌農桿菌的檢測方法，其特征在于，以植物基因組DNA為模板，利用序列如SEQID NO.2-3所示的引物對和序列如SEQ ID NO.4所示的探針進行微滴數字PCR擴增；
所述微滴數字PCR擴增的反應程序包括：95℃預變性5-10min；95℃變性25-35s，55-56℃退火40-50s，72℃延伸25-35s，共35-45個循環；98℃固化微滴6-12min；
所述引物對的濃度為0.45-0.75μM，所述探針的濃度為0.15-0.25μM。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述探針的5’端采用FAM熒光基團標記，3’端采用BHQ1淬滅基團標記。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，根據陽性微滴的數量判斷植物是否被根癌農桿菌侵染或根癌農桿菌侵染的拷貝數。
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