[發明專利]一種新冠病毒檢測試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 202011056732.4
• 申請日: 2020-09-30
• 公開（公告）號: CN112048574A
• 公開（公告）日: 2020-12-08
• 發明（設計）人: 韓亞平;柴旭陽;臧百盛;張淼;顧城瑋
• 申請（專利權）人: 北京吉檢醫療科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京艾格律詩專利代理有限公司 11924
• 代理人: 謝毅

1.一種用于檢測新型冠狀病毒基因的引物探針組，其特征在于，包括用于檢測ORF1ab基因的引物探針組Covid-19A、用于檢測N基因的引物探針組Covid-19B和用于檢測E基因的引物探針組Covid-19C中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的用于檢測新型冠狀病毒基因的引物探針組，其特征在于，所述用于檢測ORF1ab基因的引物探針組包括引物ORF1ab-F和ORF1ab-R以及檢測用探針ORF1ab-P；所述用于檢測N基因的引物探針組包括引物N-F和N-R以及檢測用探針N-P；所述用于檢測E基因的引物探針組包括引物E-F和E-R以及檢測用探針E-P。

3.根據權利要求2所述的用于檢測新型冠狀病毒基因的引物探針組，其特征在于，所述引物探針組的序列信息如下:

ORF1ab-F:TGGTACTGGTCAGGCAATAAC,

ORF1ab-R:TGATCTATGTGGCAACGGC,

ORF1ab-P:CTTTGGTGGTGCATCGTGTTGTCT；

N-F:GACCCCAAAATCAGCGAAATG

N-R:CCACTGCGTTCTCCATTCTG

N-P:TGCCAGTTGAATCTGAGGGTCCAC；

E-F:CGGAAGAGACAGGTACGTTAATAG

E-R:CGCAGTAAGGATGGCTAGTG

E-P:ACCACGAAAGCAAGAAAAAGAAGTACGC。

4.根據權利要求1所述的用于檢測新型冠狀病毒基因的引物探針組，其特征在于，所述探針的5’端標記有熒光基團，3’端標記有熒光淬滅基團，針對不同靶基因的探針分別標記有不同的熒光基團。

5.一種新冠病毒檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的用于檢測新型冠狀病毒基因的引物探針組。

6.根據權利要求5所述的新冠病毒檢測試劑盒，其特征在于，還包括用于PCR檢測的Tris緩沖液、鎂離子、dA/G/C/UTPs、DNA聚合酶、逆轉錄酶、UNG酶。

7.根據權利要求6所述的新冠病毒檢測試劑盒，其特征在于，還包括內標及用于檢測內標的引物探針組。進一步的，具體包括引物RP-F和RP-R以及檢測用探針RP-P，其具體序列為：

RP-F：AGATTTGGACCTGCGAGCG，

RP-R：GAGCGGCTGTCTCCACAAGT，

RP-P：TTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG。

8.一種新冠病毒檢測方法，其特征在于，采用權利要求6所述新冠病毒檢測試劑盒，利用PCR技術進行檢測。

9.根據權利要求8所述的新冠病毒檢測方法，其特征在于，所述引物在PCR反應體系中的終濃度之和在50～500nM之間，所述探針在PCR反應體系中終濃度之和在25～250nM之間。

10.根據權利要求8所述的新冠病毒檢測方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

(1)樣本處理；

(2)試劑準備；

(3)加樣；

(4)PCR擴增；

(5)結果分析。