[發(fā)明專利]D-二聚體測(cè)定試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011055793.9
• 申請(qǐng)日: 2020-09-28
• 公開（公告）號(hào): CN112213498A
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 師冰洋;吳海剛;席國(guó)磊;張永歡;師曉兵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南邁達(dá)斯實(shí)業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 張金銘

本發(fā)明提供了一種D?二聚體測(cè)定試劑盒及其應(yīng)用，涉及檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供的D?二聚體測(cè)定試劑盒，其中鼠抗人D?二聚體單克隆抗體膠乳顆粒由鼠抗人D?二聚體單克隆抗體結(jié)合至6?氨基己酸修飾的聚苯乙烯膠乳顆粒制備得到，通過在聚苯乙烯膠乳顆粒表面修飾6?氨基己酸，能夠有效延長(zhǎng)聚苯乙烯膠乳顆粒表面的羧基鏈長(zhǎng)。同時(shí)，本發(fā)明通過限定溶解6?氨基己酸的PBST溶液的pH為8.0?9.0，能夠進(jìn)一步提高鼠抗人D?二聚體單克隆抗體與6?氨基己酸修飾的聚苯乙烯膠乳顆粒的結(jié)合效率。此外，該試劑盒還具有操作方法簡(jiǎn)單，快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好可常溫保存等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種D-二聚體測(cè)定試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

纖維蛋白溶解系統(tǒng)是人體中最重要的抗凝系統(tǒng)，它對(duì)保持人體血管壁的通透性以及物質(zhì)交換有著重要的作用。迄今為止，針對(duì)纖維蛋白溶解系統(tǒng)功能性檢測(cè)，主要采用免疫比濁法定量檢測(cè)纖溶酶降解纖維蛋白原和交聯(lián)纖維蛋白形成的各種可溶性片段，統(tǒng)稱為纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)，其中D-二聚體則是降解產(chǎn)物中最小片段，是交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物。

近幾年來(lái)，已經(jīng)建立了多種有價(jià)值的D-二聚體檢測(cè)方法，主要包括乳膠凝集法、酶聯(lián)免疫吸附法、熒光抗體檢測(cè)法、免疫金標(biāo)法以及膠乳免疫比濁法。其中膠乳免疫比濁法由于其操作簡(jiǎn)單、快速，更適用于急診檢測(cè)，用于定性或半定量檢測(cè)。

然而，迄今為止，膠乳微球-抗體復(fù)合物的制備，均采用偶聯(lián)試劑進(jìn)行偶聯(lián)，且抗體與剛性微球進(jìn)行結(jié)合時(shí)，更趨向熱力學(xué)因素影響，導(dǎo)致抗體在表面結(jié)合時(shí)影響活性位點(diǎn)的暴露。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的在于提供一種D-二聚體測(cè)定試劑盒，以至少緩解了現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。

本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供上述一種D-二聚體測(cè)定試劑盒在血凝分析儀和生化分析儀的檢測(cè)中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一種D-二聚體測(cè)定試劑盒，所述D-二聚體測(cè)定試劑盒包括D-二聚體R1試劑和D-二聚體R2試劑；

所述D-二聚體R1試劑包括緩沖溶液、促凝劑和防腐劑；

所述D-二聚體R2試劑包括鼠抗人D-二聚體單克隆抗體膠乳顆粒、緩沖溶液、穩(wěn)定劑和防腐劑；

所述鼠抗人D-二聚體單克隆抗體膠乳顆粒由鼠抗人D-二聚體單克隆抗體結(jié)合至6-氨基己酸修飾的聚苯乙烯膠乳顆粒制備得到；

所述6-氨基己酸修飾的聚苯乙烯膠乳顆粒通過如下方法制備：

將預(yù)處理后的聚苯乙烯膠乳顆粒經(jīng)6-氨基己酸的PBST溶液溶解，反應(yīng)后固液分離，得到所述經(jīng)6-氨基己酸修飾的聚苯乙烯膠乳顆粒；

其中，所述PBST的pH為8.0-9.0。

進(jìn)一步的，所述預(yù)處理包括向MES溶液中加入聚苯乙烯膠乳顆粒水溶液，然后再依次加入EDC溶液和NHS溶液，混合反應(yīng)后，固液分離得到預(yù)處理后的聚苯乙烯膠乳顆粒；

優(yōu)選地，用0.1M的MES溶液配制濃度為100mg/ml的EDC溶液；

優(yōu)選地，用0.1M的MES溶液配制濃度為100mg/ml的NHS溶液；

優(yōu)選地，所述MES溶液的pH為6.0；

優(yōu)選地，所述聚苯乙烯膠乳顆粒水溶液的濃度為10mg/ml。